生物化學實驗(第2版)（簡體書）

生物化學實驗分九章共63個實驗項目，包括糖類物質的檢測與分析、脂類物質的檢測與分析、氨基酸的檢測與分析、蛋白質的分離制備與分析、酶的分離制備與分析、維生素的檢測分析、核酸的分離與分析、綜合性與設計性實驗等常用生物化學實驗內容。另外還介紹了生物化學實驗的基本知識與基本操作，并在最后附上生物化學實驗中常用參數，供實驗中參考。

目錄
第一章實驗基本知識與基本操作(1)
第一節生物化學實驗室規則(1)
第二節實驗室安全和防護知識(2)
第三節基礎實驗操作技能(6)
第三節實驗誤差與提高實驗準確度的方法(39)
第四節實驗記錄與實驗報告(44)
第二章糖類物質的檢測與分析(48)
第一節糖的呈色反應和還原糖的檢驗(48)
第二節苯酚硫酸法測定總糖濃度(50)
第三節還原糖的測定——3，5二硝基水楊酸比色法(52)
第四節粗淀粉的測定——1％鹽酸旋光法(54)
第五節血糖的測定(57)
Ⅰ磷鉬酸比色法(57)
Ⅱ蒽酮比色法(59)

目錄
第一章實驗基本知識與基本操作(1)
第一節生物化學實驗室規則(1)
第二節實驗室安全和防護知識(2)
第三節基礎實驗操作技能(6)
第三節實驗誤差與提高實驗準確度的方法(39)
第四節實驗記錄與實驗報告(44)
第二章糖類物質的檢測與分析(48)
第一節糖的呈色反應和還原糖的檢驗(48)
第二節苯酚硫酸法測定總糖濃度(50)
第三節還原糖的測定——3，5二硝基水楊酸比色法(52)
第四節粗淀粉的測定——1％鹽酸旋光法(54)
第五節血糖的測定(57)
Ⅰ磷鉬酸比色法(57)
Ⅱ蒽酮比色法(59)
Ⅲ葡萄糖氧化酶過氧化物酶法(GODPOD法)(61)
第六節糖酵解中間產物的鑒定(63)
第七節可溶性糖的硅膠G薄層層析(65)
第三章脂類物質的檢測與分析(68)
第一節粗脂肪含量的測定——索氏抽提法(68)
第二節脂肪酸值的測定——堿滴定法(69)
第三節油脂皂化與皂化值的測定(72)
第四節碘價的測定(Hanus法)(73)
第五節血清膽固醇的測定(75)
Ⅰ化學比色法(75)
Ⅱ酶法(76)
第六節卵磷脂的提取與鑒定(78)
第七節脂肪酸的β氧化(80)
第四章氨基酸的檢測與分析(83)
第一節紙層析法分離鑒定氨基酸(83)
第二節甲醛滴定法測定氨基氮含量(85)
第三節瓦氏呼吸儀法測定L谷氨酸的含量(87)
第五章蛋白質的分離制備與分析(91)
第一節蛋白質的兩性反應與等電點的測定(91)
第二節蛋白質的沉淀反應、顏色反應及電荷的測定(93)
第三節蛋白質含量測定(一)——微量凱氏定氮法(97)
第四節蛋白質含量測定(二)(101)
Ⅰ雙縮脲法(101)
Ⅱ考馬斯亮藍G250法(Bradford法)(104)
ⅢFolin試劑法(106)
BCA法(108)
Ⅴ紫外(UV)吸收測定法(109)
第五節酪蛋白的制備(112)
第六節凝膠層析法分離蛋白質(113)
第七節血紅蛋白的凝膠過濾(115)
第八節蛋白質相對分子質量的測定SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法(118)
第九節血清蛋白質乙酸纖維薄膜電泳(126)
第六章酶的分離制備與分析(130)
第一節酶的特性——底物專一性(130)
第二節pH值對酶活性的影響(132)
實驗三溫度對酶活性的影響(133)
第四節脲酶米氏常數的測定(135)
第五節糖化型淀粉酶活力的測定(138)
第六節脂肪酶活性測定(140)
第七節乳酸脫氫酶活力的測定(142)
第八節大麥萌發前后淀粉酶活力的測定(144)
第九節發色底物測定大曲中α1，4葡萄糖苷酶活力(147)
第七章維生素的檢測分析(150)
第一節維生素B1的熒光測定(150)
第二節維生素B2的測定(152)
第三節植物中抗壞血酸含量的測定(155)
第四節維生素A的測定(156)
第八章核酸的分離與分析(160)
第一節哺乳動物基因組DNA的提取(160)
第二節植物基因組DNA的提取(162)
第三節植物總RNA的提取與電泳(165)
第四節酵母RNA的分離與組分鑒定(167)
第五節組織和細胞RNA的制備(170)
第六節核苷酸的紙電泳(172)
第七節紫外分光光度法測定核酸的含量(174)
第八節RNA與DNA的測定(176)
第九節DNA的瓊脂糖凝膠電泳(179)
第十節質粒DNA的微量制備(堿裂解法、煮沸法)(182)
第十一節質粒DNA的酶切鑒定及瓊脂糖凝膠電泳(187)
第十二節質粒DNA的大量制備與純化(189)
第十三節大腸桿菌感受態細胞的制備與轉化(193)
第十四節PCR基因擴增(198)
第九章綜合性與設計性實驗(200)
第一節雞卵類黏蛋白的分離純化(200)
第二節纖維素酶活性測定及pH值對其活性的影響(205)
第三節酪氨酸酶的提取及其催化活性研究(208)
第四節酵母蔗糖酶的純化及性質研究(212)
Ⅰ酵母蔗糖酶的提取與純化(212)
Ⅱ蔗糖酶Km值測定及脲的抑制作用(213)
ⅢpH值對酶活性的影響和最適pH值的測定(217)
Ⅳ溫度對酶活性的影響和反應活化能的測定(220)
第五節固定化酵母細胞及蔗糖酶活性的檢測(222)
第六節溫度、pH值、激活劑和抑制劑對唾液淀粉酶活性的影響(224)
第七節溶菌酶結晶的制備及活性測定(226)
第八節轉基因農產品的PCR檢測(230)
第九節橘皮果膠的提取及果凍的制備(235)
第十節發酵過程中無機磷的利用和ATP的生成(236)
附錄實驗室中常用參數(239)
參考文獻(240)

前言
生命科學在20世紀有了驚人的發展，并已經成為當今世界三大發展最快的現代科學之一。生物化學是生命科學領域中的重要組成部分,也是較為活躍的學科之一。作為一門以實驗為基礎的學科，生物化學實驗方法和研究技術成為推動生物化學發展的重要動力。加強與提高生物化學實驗技術的研究與教學，對生物化學課程的學習具有重要作用。與傳統生物化學實驗內容相比，當今生物化學研究更多地涉及生命現象的本質與化學基礎，并廣泛探討生物分子結構與功能的關系、信息傳遞過程及基因表達調控的規律等，這使得現代生物化學實驗研究與教學在內容上更加深入，更加廣泛。
為了適應學科的發展及 “十二五”期間我國高等教育改革的需要，充分體現學科發展狀況，體現素質教育、創新教育及個性教育的思想，圍繞“培養高素質、寬口徑人才”的目標，提高教學水平和教學質量，并結合近年來生物化學實驗技術和方法的發展及實驗室條件，在華中科技大學出版社的協調與組織下，相關院校共同編寫了適合普通院校使用的生物化學實驗教材，以適應當今生物化學學科發展的需要。
本書適合作為普通高等院校各類理工科專業的生物化學實驗課教材或參考書。
本書由劉志國主編。參加本書編寫的有：武漢輕工大學劉志國、劉軍、閻達中，青島科技大學于建生、劉杰、李紅芳，湖北工業大學陳雄、王金華、吳正奇，武漢生物工程學院廖貴芹，陜西科技大學李敏康、宋宏新，大連工業大學金朝霞，陜西理工學院田光輝，西華大學車振明、李明元，信陽農林學院王欣、趙麗萍、張耀州。武漢輕工大學生物技術教研室的其他老師(丁洪波、曾萬勇、呂玲肖等)也參加了部分校訂工作。華中科技大學出版社對本書的編寫給予了大力支持與幫助，在此表示衷心的感謝。