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分子生物學實驗（簡體書）
- 系列名：高等院校素質教育通選課教材
- ISBN13：9787301144367
- 出版社：北京大學出版社
- 作者：汪天虹
- 裝訂／頁數：平裝／182頁
- 規格：24cm*17cm (高/寬)
- 版次：1
- 出版日：2016/08/29
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商品簡介
目次
商品簡介
本書首先對分子生物學實驗原理與技術進行了概括性介紹。在此基礎上，對分子生物學實驗的基本技術與方法，包括對來自動植物、微生物細胞的DNA和RNA樣品的制備、克隆和表達載體的制備、重組質粒的構建、重組DNA導入各種受體細胞、外源基因的表達和重組子的鑒定、用酵母表達系統克隆和表達基因、絲狀真菌遺傳轉化系統的基本操作、各種PCR技術原理與應用、工程菌的培養與目標產物的分離等多方面進行了闡述。每章均在詳細介紹相關實驗技術基本原理的基礎上，將基礎性實驗內容和部分提高、創新性實驗內容的操作過程詳細列出，以訓練和提升學生和其他相關研究人員的分子生物學實驗技能。本書10章共涵蓋40個實驗，可供不同需求人員選用。在重點介紹通用的大腸桿菌分子生物學實驗技術的基礎上，本書對近年來發展迅速的酵母和絲狀真菌分子生物學實驗技術作了較系統的介紹，希望對從事相關內容科研的研究生和科研人員有所裨益。本書可作為高等學校生物學科各專業本科生和研究生的分手生物學實驗指導教材，同時對從事相關領域的教學、科研人員來說也是一本有益的參考書。
目次
第1章 分子生物學實驗原理與技術概述
第2章 染色體DNA和RNA的制備
實驗2.1 細菌染色體DNA的提取
實驗2.2 酵母染色體DNA的提取
實驗2.3 SDS裂解法提取絲狀真菌染色體DNA
實驗2.4 RNA的提取
實驗2、5 凝膠電泳進行DNA分離純化
實驗2.6 核酸純度、濃度與相對分子質量的測定
第3章 載體的制備
實驗3.1 質粒DNA的提取——堿變性提取法
實驗3.2 λ噬菌體DNA的提取
實驗3.3 λDNA去磷酸化臂的制備
第4章 重組質粒的構建
實驗4.1 限制性核酸內切酶的酶切反應
實驗4.2 酶切DNA片段的CIP處理
實驗4.3 酶切DNA片段的分離與回收
實驗4.4 載體與外源DNA的連接反應
第5章 重組DNA導入受體細胞
實驗5.1 感受態細胞的制備及質粒轉化
實驗5.2 λ噬菌體載體與外源DNA片段的連接、體外包裝與擴增（基因組文庫的構建）
第6章 重組子的鑒定和外源基因的表達
實驗6.1 E.coli轉化子的篩選與驗證
實驗6.2 Southern印跡雜交
實驗6.3 Northern印跡雜交
實驗6.4 斑點印跡雜交
實驗6.5 外源基因的誘導表達
實驗6.6 變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測重組蛋白的表達
實驗6.7 Western印跡技術檢測重組蛋白的表達
第7章 在釀酒酵母中克隆表達外源基因
實驗7.1 酵母染色體DNA的提取
實驗7.2 木糖還原酶基因的獲得
實驗7.3 重組質粒的構建（酶切連接）
實驗7.4 酵母質粒的小量提取與插人方向驗證
實驗7.5酵母菌LiAc完整轉化酵母細胞
實驗7.6釀酒酵母轉化子的驗證
實驗7.7重組酵母木糖還原酶活性的測定
實驗7.8重組酵母菌株發酵實驗及發酵產物分析
第8章 絲狀真菌的轉化與轉化子的篩選
實驗8.1 瑞氏木霉原生質體的制備與轉化實驗
實驗8.2 瑞氏木霉原生質體電轉化實驗
實驗8.3 農桿菌介導的瑞氏木霉轉化
實驗8.4 振蕩破壁法快速小量提取瑞氏木霉染色體DNA
實驗8.5 瑞氏木霉潮霉素抗性轉化子的PCR鑒定
第9章 PCR技術原理與應用
實驗9.1 PCR擴增目的片段
實驗9.2 一步法RT—PCR
實驗9.3 兩步法RT—PCR
第10章 工程菌的培養與目標產物的分離
實驗10.1 重組E.coli誘導表達外源內切B-1，4-葡聚糖酶
實驗10.2 從E.coli中提取純化目的重組蛋白
附錄
第2章 染色體DNA和RNA的制備
實驗2.1 細菌染色體DNA的提取
實驗2.2 酵母染色體DNA的提取
實驗2.3 SDS裂解法提取絲狀真菌染色體DNA
實驗2.4 RNA的提取
實驗2、5 凝膠電泳進行DNA分離純化
實驗2.6 核酸純度、濃度與相對分子質量的測定
第3章 載體的制備
實驗3.1 質粒DNA的提取——堿變性提取法
實驗3.2 λ噬菌體DNA的提取
實驗3.3 λDNA去磷酸化臂的制備
第4章 重組質粒的構建
實驗4.1 限制性核酸內切酶的酶切反應
實驗4.2 酶切DNA片段的CIP處理
實驗4.3 酶切DNA片段的分離與回收
實驗4.4 載體與外源DNA的連接反應
第5章 重組DNA導入受體細胞
實驗5.1 感受態細胞的制備及質粒轉化
實驗5.2 λ噬菌體載體與外源DNA片段的連接、體外包裝與擴增（基因組文庫的構建）
第6章 重組子的鑒定和外源基因的表達
實驗6.1 E.coli轉化子的篩選與驗證
實驗6.2 Southern印跡雜交
實驗6.3 Northern印跡雜交
實驗6.4 斑點印跡雜交
實驗6.5 外源基因的誘導表達
實驗6.6 變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測重組蛋白的表達
實驗6.7 Western印跡技術檢測重組蛋白的表達
第7章 在釀酒酵母中克隆表達外源基因
實驗7.1 酵母染色體DNA的提取
實驗7.2 木糖還原酶基因的獲得
實驗7.3 重組質粒的構建（酶切連接）
實驗7.4 酵母質粒的小量提取與插人方向驗證
實驗7.5酵母菌LiAc完整轉化酵母細胞
實驗7.6釀酒酵母轉化子的驗證
實驗7.7重組酵母木糖還原酶活性的測定
實驗7.8重組酵母菌株發酵實驗及發酵產物分析
第8章 絲狀真菌的轉化與轉化子的篩選
實驗8.1 瑞氏木霉原生質體的制備與轉化實驗
實驗8.2 瑞氏木霉原生質體電轉化實驗
實驗8.3 農桿菌介導的瑞氏木霉轉化
實驗8.4 振蕩破壁法快速小量提取瑞氏木霉染色體DNA
實驗8.5 瑞氏木霉潮霉素抗性轉化子的PCR鑒定
第9章 PCR技術原理與應用
實驗9.1 PCR擴增目的片段
實驗9.2 一步法RT—PCR
實驗9.3 兩步法RT—PCR
第10章 工程菌的培養與目標產物的分離
實驗10.1 重組E.coli誘導表達外源內切B-1，4-葡聚糖酶
實驗10.2 從E.coli中提取純化目的重組蛋白
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