生物化學與分子生物學實驗（簡體書）

《生物化學與分子生物學實驗》分為分子生物學實驗及生物化學實驗兩部分，共沒計了24個綜合性較強的實驗，其中14個分子生物學實驗以應用廣泛的綠色熒光蛋白基因為主線貫穿，涵蓋了分子生物學的基本實驗技術，包括原核生物細胞轉化。質粒DNA的分離純化，限制性內切酶對質粒DNA的酶切與瓊脂糖凝膠電泳鑑定，重組技術，PCR基因擴增，基因突變技術，蛋白質電泳分離表達蛋白，蛋白質轉移技術，蛋白質分離純化技術等。10個生物化學實驗涉及常用的電泳技術、親和色譜技術和免疫學實驗技術。《生物化學與分子生物學實驗》作為普通高等教育“十一五”國家級規劃教材，是北京大學多年實驗教學改革的成果，充分體現了實驗內容的綜合性。通過學習和訓練，學生們在創新性思維和科研動手能力上都會得到很大提高，適合高等院校生命科學類專業本科生和研究生使用。

第一部分 分子生物學實驗
背景資料
實驗1 綠色熒光蛋白(GFP)基因轉入原核細胞
實驗2 目的基因載體的分離純化與質量測定
實驗3 含綠色熒光蛋白基因載體的酶切與電泳鑑定
實驗4 增強型綠色熒光蛋白基因表達載體的構建
實驗5 綠色熒光蛋白基因的表達與鑑定
實驗6 PCR體外擴增綠色熒光蛋白基因及其克隆與表達
實驗7 紅色熒光蛋白、黃色熒光蛋白基因的克隆和在大腸桿菌中的表達
實驗8 谷胱甘肽轉硫酶一綠色熒光蛋白融合蛋白的基因克隆及其表達
實驗9 增強型綠色熒光蛋白的定點突變及表達檢測
實驗10 攜帶增強型綠色熒光蛋白報告基因的溫度敏感型表達載體的構建、鑑定和表達量的測定
附錄10－1：pBV220全序列(從ZCoRI酶切位點第一個A開始)
附錄10－2：EGFP基因全序列
實驗11 雙報告基因系統的構建及初步檢測
附錄11－1：L、aciferase基因全序列
附錄11－2：螢光素酶檢測步驟
實驗12 以綠色熒光蛋白(GFP)為報告基因構建重組酵母檢測環境中雌二醇的含量
實驗13 綠色熒光蛋白的分離、純化及其鑑定
實驗14 谷胱甘肽轉硫酶與綠色熒光蛋白融合蛋白的分離、純化和酶學的測定
附錄Ⅰ

第二部分 生物化學實驗
電泳技術
實驗15 SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳
實驗16 聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳
實驗17 聚丙烯酰胺凝膠雙向電泳親和色譜技術
實驗18 雞卵黏蛋白的分離純化
實驗19 胰蛋白酶粗提取與活性測定
實驗20 親和色譜分離胰蛋白酶
實驗21 胰蛋白酶動力學測定免疫學技術
實驗22 抗血清的制備
實驗23 抗血清抗體的測定
實驗24 酶聯免疫吸附測定
附錄Ⅱ