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目次
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本書是作者在多年從事基因工程的教學和科研的基礎上,通過不斷總結、充實、修改后編寫而成的。本書在全面論述基因和基因工程基本概念的基礎上,系統地闡述了有關基因克隆分離、鑒定;基因重組的常用工具酶、載體以及重組技術;詳細地介紹了重組子的篩選、分離及鑒定方法;著重論述了在原核和真核表達系統中的基因表達及調控;專題介紹了基因工程在基因制藥、基因工程疫苗及抗體和基因治療中的應用,并結合科研實際增加了應用實例,充分體現了理論與實踐的結合。 本書內容全面、系統,既有新理論,又有新技術、新方法和新進展,方法具體,具有可操作性,實用性強。可供醫學、生物技術和生物制藥專業的教師及研究人員參考,尤其適于用作醫學、生物技術及生物制藥專業的研究生、本科生的教材。
目次
第一章 核酸的結構與功能,基因及基因工程的概念
第一節 核酸的結構與功能
一、核酸的化學組成
二、DNA的結構與功能
三、RNA的空間結構與功能
第二節 基因和基因工程的概念
一、基因的概念
二、基因組
三、基因工程的定義和研究內容
四、基因工程的發展史
五、基因工程的誕生
復習思考題
第二章 基因工程中常用的工具酶
第一節 限制性核酸內切酶與DNA分子的體外切割
一、限制性核酸內切酶的制備方法
二、限制性核酸內切酶分類和命名
三、Ⅱ型限制性核酸內切酶的基本特性
四、影響限制性核酸內切酶活性的因素
第二節 DNA連接酶和DNA分子的體外連接
一、DNA連接酶
二、DNA分子的體外連接
第三節 其他工具酶
一、大腸桿菌DNA聚合酶I(E.Coli DNA PolⅠ)
二、DNA聚合酶I大片段(Klenow 酶)
三、T4DNA聚合酶
四、逆轉錄酶
五、末端脫氧核苷酰轉移酶
六、核酸酶Sl
七、核酸酶BAL31
八、外切核酸酶Ⅲ
九、T4多聚核苷酸激酶
十、堿性磷酸酶
十一、甲基化酶
復習思考題
第三章 基因克隆載體
第一節 質粒載體
一、質粒的基本特性
二、質粒的分離純化方法
三、質粒載體的選擇
四、大腸桿菌質粒載體
五、多種功能的衍生質粒的組建
第二節 噬菌體載體
一、噬菌體的一般生物學特性
二、λ噬菌體載體
三、黏性質粒
四、單鏈DNA噬菌體載體
第三節 真核細胞的克隆載體
一、在酵母細胞中克隆基因常用的載體
二、植物基因克隆的載體——Ti質粒
三、動物細胞基因克隆的載體
復習思考題
第四章 目的基因的分離和克隆
第一節 目的基因的獲得
一、基因的合成
二、建立基因組DNA文庫
三、構建cDNA文庫篩選目的基因
四、其他方法
第二節 獲得目的基因方法的選擇
一、根據獲得目的基因的研究目的選擇方法
二、根據目的基因本身特點選擇方法
三、根據實驗室設備條件選擇方法
第三節 目的基因重組體的構建
一、質粒DNA的分離純化
二、目的基因與載體的連接
復習思考題
第五章 重組DNA導入宿主細胞與轉化子的篩選
第一節 重組DNA向宿主細胞的導入
一、轉化(transformation)
二、通過接合作用傳遞質粒DNA
三、通過轉染/轉導作用傳遞遺傳物質
第二節 轉化子的篩選與鑒定
一、利用遺傳標志的表型特征篩選
二、根據重組子的結構特征篩選
……
復習思考題
科研實例
第六章 外源基因在大腸桿菌中的表達調控
第七章 外源基因在真核細胞中表達及調控
第八章 基因突變
第九章 家蠶核多角體桿狀病毒基因轉移載體及其在家蠶細胞中對外源性基因的表達
第十章 基因工程技術與國民經濟的關系及其應用
第十一章 基因工程疫苗的研究與開發
第十二章 基因工程抗體與導向藥物
第十三章 基因治療
第十四章 轉基因動物和動物克隆
“醫用基因工程”(專業課)總復習練習題
附錄
參考文獻
第一節 核酸的結構與功能
一、核酸的化學組成
二、DNA的結構與功能
三、RNA的空間結構與功能
第二節 基因和基因工程的概念
一、基因的概念
二、基因組
三、基因工程的定義和研究內容
四、基因工程的發展史
五、基因工程的誕生
復習思考題
第二章 基因工程中常用的工具酶
第一節 限制性核酸內切酶與DNA分子的體外切割
一、限制性核酸內切酶的制備方法
二、限制性核酸內切酶分類和命名
三、Ⅱ型限制性核酸內切酶的基本特性
四、影響限制性核酸內切酶活性的因素
第二節 DNA連接酶和DNA分子的體外連接
一、DNA連接酶
二、DNA分子的體外連接
第三節 其他工具酶
一、大腸桿菌DNA聚合酶I(E.Coli DNA PolⅠ)
二、DNA聚合酶I大片段(Klenow 酶)
三、T4DNA聚合酶
四、逆轉錄酶
五、末端脫氧核苷酰轉移酶
六、核酸酶Sl
七、核酸酶BAL31
八、外切核酸酶Ⅲ
九、T4多聚核苷酸激酶
十、堿性磷酸酶
十一、甲基化酶
復習思考題
第三章 基因克隆載體
第一節 質粒載體
一、質粒的基本特性
二、質粒的分離純化方法
三、質粒載體的選擇
四、大腸桿菌質粒載體
五、多種功能的衍生質粒的組建
第二節 噬菌體載體
一、噬菌體的一般生物學特性
二、λ噬菌體載體
三、黏性質粒
四、單鏈DNA噬菌體載體
第三節 真核細胞的克隆載體
一、在酵母細胞中克隆基因常用的載體
二、植物基因克隆的載體——Ti質粒
三、動物細胞基因克隆的載體
復習思考題
第四章 目的基因的分離和克隆
第一節 目的基因的獲得
一、基因的合成
二、建立基因組DNA文庫
三、構建cDNA文庫篩選目的基因
四、其他方法
第二節 獲得目的基因方法的選擇
一、根據獲得目的基因的研究目的選擇方法
二、根據目的基因本身特點選擇方法
三、根據實驗室設備條件選擇方法
第三節 目的基因重組體的構建
一、質粒DNA的分離純化
二、目的基因與載體的連接
復習思考題
第五章 重組DNA導入宿主細胞與轉化子的篩選
第一節 重組DNA向宿主細胞的導入
一、轉化(transformation)
二、通過接合作用傳遞質粒DNA
三、通過轉染/轉導作用傳遞遺傳物質
第二節 轉化子的篩選與鑒定
一、利用遺傳標志的表型特征篩選
二、根據重組子的結構特征篩選
……
復習思考題
科研實例
第六章 外源基因在大腸桿菌中的表達調控
第七章 外源基因在真核細胞中表達及調控
第八章 基因突變
第九章 家蠶核多角體桿狀病毒基因轉移載體及其在家蠶細胞中對外源性基因的表達
第十章 基因工程技術與國民經濟的關系及其應用
第十一章 基因工程疫苗的研究與開發
第十二章 基因工程抗體與導向藥物
第十三章 基因治療
第十四章 轉基因動物和動物克隆
“醫用基因工程”(專業課)總復習練習題
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