植物生理學實驗（簡體書）

《植物生理學實驗》配合理論課程教學內容，按照植物水分生理，植物礦質營養，植物光合作用，植物的呼吸作用，植物激素生理，植物生長、發育、成熟、衰老和脫落生理，植物逆境生理的順序，由淺入深地針對各個生理過程，編入了基礎性實驗、拓展性實驗和設計性實驗，旨在滿足學生們系統掌握植物生理學實驗技術和進行深入研究的能力的需要，為切實加強本科實驗教學提供實用的實驗指導書。

《普通高等學校精品課程建設教材:植物生理學實驗》旨在滿足學生們系統掌握植物生理學實驗技術和進行深入研究的能力的需要，為切實加強本科實驗教學提供實用的實驗指導書。

第1章植物生理學實驗基礎
1.1實驗設計與樣品準備
1.2常規儀器與操作技術
1.3實驗數據處理與分析

第2章植物材料培養
2.1植物溶液培養
2.2土壤培養
2.3植物組織培養

第3章植物水分生理
基礎實驗
3.1植物組織含水量和相對含水量的測定
3.2植物組織中自由水和束縛水含量的測定
3.3植物組織水勢的測定
3.4細胞滲透勢的測定（質壁分離法）
3.5植物吐水和傷流現象的觀察
拓展實驗
3.6K+對氣孑L開度的影響
3.7植物蒸騰速率的測定
3.8植物傷流液中糖、氨基酸和礦質元素含量的分析設計實驗
3.9水分脅迫下ABA對氣孔開度的影響
3.10水分脅迫對植物水分代謝、光合作用和呼吸作用的影響

第4章植物礦質營養
基礎實驗
4.1植物溶液培養法觀察缺素症
4.2單鹽毒害與離子拮抗現象觀察
4.3TTC法和a一萘胺法測定植物根系活力
4.4植物組織中總氮含量的測定
4.5植物組織中可溶性蛋白質含量的測定
拓展實驗
4.6離體法測定植物NR活力
4.7植物組織中金屬元素含量的測定（原子吸收法和ICP法）.
4.8植物細胞質膜H+-ATPase活力的測定
設計實驗
4.9超積累植物修復重金屬污染土壤的研究

第5章植物光合作用
基礎實驗
5.1光合色素提取和理化性質分析
5.2光合色素的分離及其吸收光譜
5.3葉綠素含量的測定（比色法）
5.4葉綠體Hill反應活力的測定
5.5紅外氣體交換方法測定葉片光合速率
拓展實驗
5.6葉綠素熒光參數分析測定
5.7光合作用光響應曲線和ACi響應曲線的測定
5.8氧電極方法測定葉圓片光合速率
5.9RuBP羧化酶活性的測定
5.10PEP羧化酶活性的測定
5.11蔗糖合成酶（SS）與蔗糖磷酸合成酶（SPS）活性的測定
設計實驗
5.12光抑制條件下植物光合速率、氣孑L導度和葉綠素熒光參數的變化
5.13環境條件對植物光合作用和同化物積累的影響

第6章植物的呼吸作用
基礎實驗
6.1植物呼吸速率的測定
6.2植物組織呼吸商的測定
6.3植物組織中H。O：含量的測定
拓展實驗
6.4植物線粒體的提取
6.5呼吸抑制劑對呼吸作用的影響
6.6抗壞血酸（AsA）含量的測定
6.7抗壞血酸過氧化物酶（AsA-POD）活性的測定
6.8植物體內多酚氧化酶活性的測定
6.9苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的測定
6.10植物組織中ATP含量的測定
設計實驗
6.11不同溫度對植物根系呼吸、根系活力和礦質元素吸收的影響

第7章植物激素生理
基礎實驗
7.1生長素對種子根芽生長的影響
7.2脫落酸對種子發芽率的抑制作用
7.3生長素含量的生物試法
7.4植物激素的提取與純化
拓展實驗
7.5植物激素的ELISA測定
7.6植物多胺的層析分離與檢測
7.7植物激素對愈傷組織的形成與分化的影響
7.8氣相色譜法測定乙烯含量
7.9DR5：GUS轉基因植物中報告基因GUs的組織化學定位檢測
設計實驗
7.10乙烯誘導擬南芥根毛的形成

第8章植物的生長生理
基礎實驗
8.1植物種子活力的快速測定（BTB法，TTC法，紅墨水法與熒光法）
8.2植物相對生長速率的測定
8.3植物生長調節物質對種子萌發的影響
8.4穀物種子萌發時澱粉酶活性的測定
8.5光敏色素的提取和純化
8.6大豆萌發時氨基酸含量的變化
8.7植物細胞壁蛋白的提取和測定
拓展實驗
8.8植物組織中非結構性碳水化合物含量的測定--Uv法
8.9植物中總黃酮含量的測定
8.10多酚含量的測定
8.11擬南芥種子萌發的光敏色素及激素調控
設計實驗
8.12不同溫度對穀類種子萌發過程中生理生化的影響

第9章植物的生殖生理
基礎實驗
9.1植物春化作用與光週期現象的觀察
9.2花粉活力的測定
拓展實驗
9.3春化蛋白的誘導形成與檢測
9.4植物的親和性鑒定及不親和性的克服
設計實驗
9.5植物生長調節劑對擬南芥花期的調控

第10章植物成熟、衰老和脫落生理
基礎實驗
10.1穀物蛋白質組分的分析
10.2植物中粗脂肪含量的測定
拓展實驗
10.3植物組織中DNA的提取與含量測定
10.4植物組織中ATP酶活性的測定
10.5花色素含量的測定
10.6果實中有機酸含量的測定
10.7果實中維生素c含量的測定
設計實驗
10.8生長調節劑對果實發育的影響

第11章植物逆境生理
基礎實驗
11.1植物抗逆性的鑒定（電導法）
11.2脯氨酸含量的測定
11.3丙二醛含量的測定
11.4原生質體的分離效率、體積和失去滲透反應能力的測定
11.5SOD、POD、CAT等抗氧化酶活性的測定
拓展實驗
11.6植物體內超氧陰離子自由基（0；一）產生速率的測定
11.7植物總抗氧化能力的測定（FRAP法）
11.8植物體內GSH和GSsG含量的測定
11.9植物鹽脅迫蛋白的測定
11.10植物膜類脂的分析
設計實驗
11.11鹽脅迫對植物生物膜結構與功能的影響

附錄
附錄1植物組織培養常見的幾種基本培養基
附錄2常用緩衝液
附錄3易變質及需要特殊方法保存的試劑
附錄4常用酸堿指示劑
附錄5離心機轉速與相對離心力的換算
附錄6實驗室規則

（3）觀察。5～10 min后，倒去紅墨水，用水沖洗多次，至沖洗液無色為止。檢查種子死活，凡種胚不著色或著色很淺的為活種子；凡種胚與胚乳著色程度相同的為死種子。
保溫0.5～1 h后倒出TTC溶液，再用清水沖洗種子1～2次，觀察種胚被染色的情況：凡種胚被染成紅色的即為具有生命力的種子；種胚不被染色的為死種子；如果種胚中非關鍵性部位（如子葉的一部分）被染色，而胚根或胚芽的尖端不染色都屬于不能正常發芽的種子（染色結束后要立即進行鑒定，因放久會褪色）。
（4）記錄活種子數，計算活種子的百分率，并比較兩種方法測定的結果是否有差異。
3）熒光法
（1）直接觀察法。適用于禾谷類、松柏類及某些薔薇科植物種子生命力的鑒定，但種間的差異較大。
用刀片沿種子的中心線將種子切為兩半，使其切面向上放在無熒光的濾紙上，置于紫外光燈下照射并進行觀察。有生命力的種子在紫外光的照射下將產生明亮的藍色、藍紫色或藍綠色的熒光；喪失生命力的死種子在紫外光照射下多呈黃色、褐色以至暗淡無光，并帶有多種斑點。
隨機選取20粒待測種子按上述方法進行觀察，并記載有生命力及喪失生命力的種子的數目，然后計算有生命力種子所占百分數。與此同時也作一平行的常規發芽試驗，計算其發芽率作為對照。
（2）紙上熒光法。適用于白菜、蘿卜等十字花科植物種子活力的鑒定效果很好。
①浸種。將完整無損的種子100粒，于25～30℃水中浸泡2～3 h。
②把已吸脹的種子，以3～5 mm間隔整齊地排列在培養皿中的濕濾紙上，濾紙上水分不能過多，以免熒光物質流散彼此影響。培養皿可以不必加蓋，放置1.5～2 h，取去種子，將濾紙陰干。取出的種子仍按原來順序排列在另一培養皿中的濕濾紙上以備驗證。
③觀察。將陰干的濾紙置于紫外熒光燈下進行觀察，觀察如能在暗室中進行，則效果更好。在放過種子的位置上如見到熒光圈，則為死種子。如要確證它們是死種子，可將排列在另一培養皿中的這些種子挑出來，集中在一只培養皿的濕濾紙上，而讓不產生熒光圈的種子留在原來的培養皿中，維持濕度，讓其自然發芽。