胡楊在鹽脅迫下差異表達基因的篩選以及胡楊PeSCL7基因功能分析（簡體書）

6 胡楊SCL7基因及其啟動子的克隆與分析
GRAS／SCL蛋白是植物中特有的蛋白家族，它的名稱來源于首批獲得的三個成員GIBBERELLIN ACID INSENSITIVE（GAI）、REPRESSOR of GA1（RGA）和SCARECROW（SCR），一股由400～770個氨基酸組成。它們在植物信號轉導、激素的調節以及分生組織的保持中起關鍵性作用。GAI和RGL在GA（赤霉素）的信號轉導中有著重要作用（Silverstone等，1998），通過對突變體研究發現SCARECROW（SCR）與根的發育有關（Benfey等，1993），由于GAI、RGA、SCR和SCARECLOW-like（SCL）蚩自在C末端有著一些相同的保守結構域，而N端都具有可變區，因此被統一為GRAS／SCL家族。盡管沒有找到直接的DNA結合序列，GRAS家族蛋白仍被歸為轉錄因子家族（Riechmann等，2000；ZenteUa等，2007）。
GRAS蛋白目前在擬南芥中已分離出33種，水稻中52種，玉米中50種（Lim等，2005）。它們在植物信號轉導、激素的調節以及分生組織的保持中起關鍵性作用。對擬南芥GRAS家族蛋白進行進化樹分析后將其分為8個分支，PAT1分支被發現在光敏色素A和B信號傳導過程中具有作用（Bolle等，2000；Torres—Galea等，2006）。SCL9分支中的SCL14是一種TGA互作蛋白，含有TGA的啟動子受到SA-（水楊酸）和2，4-D-（生長素類似物）誘導后，SCL14可以調控其靶基因參與外源性化學物質和內源性可能的有害代謝產物的解毒（Fode等，2008）。在SHR分支中，SHR通過輻式信號通路調控根的輻式生長（Helariutta等，2000）。DELLA分支是在GRAS家族中具有重要功能的一類蛋白，這類蛋白在GA的信號通路里作為負調控因子調節植物生長（Silverstone等，1998）。SCR分支是一類與根的生長發育有關的蛋白（Benfey等，1993）。LS分支還未見相關研究報道。SCL4/7分支也未見相關報道，但在本試驗中，從胡楊中克隆出一個GRAS／SCL家族成員屬于這個分支，通過本實驗，證明其表達受到逆境的誘導，通過轉基因擬南芥發現其可以提高轉基因植株的抗逆性。HAM分支中的SCL6，SCL22和SCL27在先前的報道中發現是miRNA171的靶基因（Llave等，2002），其具體功能還需進一步研究。
郭華軍等（2009）利用功能基因組學手段，通過對擬南芥ATH1基因芯片數據進行生物信息學挖掘，發現了將近10個GRAS家族基因與滲透和干旱脅迫有關，其中SCL5、SCL7、SCL11、SCL13、SCL14、SCL15和SCL26最為顯著。然后進一步利用功能基因組平臺，以SCL13為例，發現SCL13基因在應答滲透和干旱脅迫時可能參與了依賴于ABA的信號轉導途徑。
本研究以GRAS／SCL轉錄因子為研究對象，在楊樹基因組數據庫分析的基礎上，通過RT-PCR的方法從鹽處理的胡楊葉片中克隆得到胡楊SCL7基因，并進行序列測定。