生物技術製藥實驗指南（簡體書）

第一章　實驗室管理和安全準則
一、實驗室一般要求
二、生物技術實驗室規則
三、生物技術實驗室的安全管理與注意事項
四、實驗室意外事故的緊急處理
第二章　生物技術實驗常用儀器及操作規范
一、玻璃器皿
二、塑料制品
三、過濾裝置
四、微量移液器及吸頭
五、pH計
六、天平
七、離心機
八、恒溫箱
九、振蕩設備 第一章　實驗室管理和安全準則
一、實驗室一般要求
二、生物技術實驗室規則
三、生物技術實驗室的安全管理與注意事項
四、實驗室意外事故的緊急處理
第二章　生物技術實驗常用儀器及操作規范
一、玻璃器皿
二、塑料制品
三、過濾裝置
四、微量移液器及吸頭
五、pH計
六、天平
七、離心機
八、恒溫箱
九、振蕩設備
十、超凈工作臺
十一、生物安全柜
十二、純水儀
十三、滅菌設備
十四、紫外-可見分光光度計
十五、熱循環儀
十六、電泳儀
十七、凝膠成像系統
十八、流式細胞儀
十九、超聲細胞破碎儀
二十、制冰機
二十一、液氮罐
二十二、冰箱
二十三、真空離心濃縮儀
二十四、基因槍
二十五、新一代高通量測序技術
第三章　顯微觀察技術
一、普通光學顯微鏡
二、相差顯微鏡
三、倒置顯微鏡
四、熒光顯微鏡
五、激光掃描共聚焦顯微鏡
六、透射電子顯微鏡
七、掃描電子顯微鏡
實驗一　細菌顯微形態特征觀察
實驗二　絲狀真菌顯微形態特征觀察
實驗三　酵母菌顯微形態特征觀察
實驗四　酵母細胞大小和數量的測定
第四章　緩沖液、培養基的配制及滅菌技術
一、溶液的配制
二、化學品和廢棄緩沖液的處理
三、儀器
實驗一　MS培養基的配制
實驗二　LB培養基的配制
第五章　核酸分析技術
一、儲存
二、純化-除去核酸中的蛋白質
三、核酸的定量
四、濃縮沉淀
五、DNA酶切反應
六、DNA連接
七、電泳
八、聚合酶鏈式反應
實驗一　堿裂解法提取質粒DNA
實驗二　DNA的瓊脂糖凝膠電泳
實驗三　細菌基因組DNA的提取和鑒定
實驗四　釀酒酵母總DNA的提取
實驗五　植物基因組DNA提取
實驗六　動物組織DNA的提取
實驗七　采用Trizol溶液提取細菌總RNA
實驗八　動物組織mRNA的提取
實驗九　DNA的酶切
實驗十　DNA的連接
實驗十一　脈沖場凝膠電泳（PFGE）
實驗十二　RNA瓊脂糖變性膠電泳分析
實驗十三　真菌ITS序列的PCR擴增
實驗十四　菌落PCR
實驗十五　DD-PCR技術
實驗十六　實時定量PCR
實驗十七　Southem印跡雜交
實驗十八　Northem雜交技術
實驗十九　原位雜交
第六章　蛋白分析技術
一、選擇沉淀
二、蛋白質的聚丙烯酰胺凝膠電泳
三、雙向凝膠電泳
四、蛋白濃度檢測
實驗一　植物中葉片蛋白質的提取
實驗二　動物組織蛋白質的提取
實驗三　蛋白質的定量（BCA法）
實驗四　蛋白質SDS—PAGE電泳
實驗五　蛋白質雙向電泳
實驗六　Western Blotting
實驗七　酶聯免疫吸附實驗
實驗八　免疫組化實驗
第七章　組織與細胞培養技術
一、動物組織培養
二、植物組織培養
實驗一　哺乳動物細胞的原代培養
實驗二　哺乳動物細胞的傳代培養
實驗三　哺乳動物細胞的凍存與復蘇
實驗四　哺乳動物細胞的融合
實驗五　兔脾細胞懸液的制備
實驗六　小鼠脾細胞培養實驗
實驗七　胡蘿卜愈傷組織的培養
實驗八　植物原生質體的制備
實驗九　原生質體分離與融合
第八章　微生物培養
一、細菌培養
二、真核微生物的培養
實驗一　藥植土壤中根際微生物的分離與計數
實驗二　細菌生長曲線的測定
實驗三　釀酒酵母海藻酸鈣的細胞固定化
第九章　轉基因技術
一、細菌轉基因
二、酵母菌轉基因
三、植物轉基因
四、動物轉基因
實驗一　CaCl2法制備感受態細胞
實驗二　質粒DNA轉化大腸桿菌感受態細胞
實驗三　電轉化法制備細菌感受態細胞
實驗四　基因槍法轉化油萊愈傷組織
實驗五　農桿菌介導的植物遺傳轉化
實驗六　逆轉錄病毒感染法制備轉基因細胞
實驗七　顯微注射法制備轉基因小鼠
第十章　誘變技術
實驗一　大腸桿菌的紫外誘變
實驗二　氨基酸營養缺陷型突變株的篩選
第十一章　生物活性物質的分離與檢測
實驗一　抗生素的微生物檢定法
實驗二　牛乳中酪蛋白的制備
實驗三　γ-球蛋白的分離
實驗四　大蒜SOD的分離提取與活力測定
實驗五　滑菇多糖的提取制備和鑒定
實驗六　凝血酶的制備
第十二章　綜合實驗
實驗一　基因組DNA文庫的構建
實驗二　突變細胞基因差異表達的研究
附錄
主要參考文獻