主要農作物組織與細胞培養技術（簡體書）

《主要農作物組織與細胞培養技術/高等農林院校實驗實訓教材》以農作物為主，匯總了糧食作物和經濟作物中常見的小麥、水稻、玉米、大豆、馬鈴薯、甘薯、高粱、油菜、向日葵、花生、蕎麥和煙草等作物的以不同組織和器官為外植體的組織和細胞培養技術。在《主要農作物組織與細胞培養技術/高等農林院校實驗實訓教材》的編寫過程中，參閱了大量的研究資料，并結合編者自身的教學實踐和科研體會，注重理論與實踐的統一，力求從愈傷組織的誘導、繼代、分化、壯苗生根及煉苗移栽等技術環節方面系統地闡明主要農作物不同外植體來源的組織與細胞培養技術。因而，《主要農作物組織與細胞培養技術/高等農林院校實驗實訓教材》既然可作為農學類及植物科學類各專業的實驗教材外，還可作為從事植物生物學相關研究人員的參考書。

第一章 基本概念與基本技術簡介
一、基本概念
二、基本設備
三、基本技術

第二章 培養基的制備
一、培養基母液的配制與保存
二、培養基配制

第三章 主要農作物組織和細胞培養技術
第一節 普通小麥組織與細胞培養技術
一、小麥幼胚培養
二、小麥成熟胚培養
三、小麥花藥培養
四、小麥花藥一步成苗
五、小麥花粉液體培養
六、小麥原生質體的制備和培養
七、小麥幼穗培養
八、小麥抗赤霉毒素細胞突變體的篩選
第二節 玉米組織與細胞培養技術
一、玉米成熟胚培養
二、玉米幼胚培養
三、玉米胚芽鞘節培養
四、玉米葉片培養
五、玉米花藥培養
六、玉米花粉細胞淺層培養
第三節 水稻組織與細胞培養技術
一、水稻花藥培養
二、水稻花粉懸浮培養
三、水稻成熟胚培養
四、水稻幼胚培養
五、水稻愈傷組織原生質體的分離與培養
六、水稻幼穗培養
第四節 馬鈴薯組織與細胞培養技術
一、馬鈴薯莖尖分生組織培養脫毒
二、馬鈴薯莖尖微繁殖
三、馬鈴薯花藥培養
四、馬鈴薯莖段培養
五、馬鈴薯葉片培養
六、馬鈴薯芽培養
第五節 大豆組織與細胞培養技術
一、大豆子葉原生質體的分離與培養
二、大豆下胚軸培養
三、大豆子葉培養
四、大豆單細胞培養
五、大豆頂芽培養
六、大豆胚尖不定芽培養
七、大豆葉片培養
第六節 甘薯組織與細胞培養技術
一、甘薯葉片與葉柄培養
二、甘薯莖尖培養
三、甘薯懸浮細胞培養
四、甘薯根倒置培養
第七節 煙草組織與細胞培養技術
一、煙草葉片培養（經愈傷組織）
二、煙草葉片培養（不經愈傷組織）
三、煙草花粉培養
四、煙草葉肉細胞的分離與培養
五、煙草根培養
第八節 油菜組織與細胞培養技術
一、油菜花柄培養
二、油菜種子培養
三、油菜花藥培養
四、油菜合子胚培養
五、油菜花蕾培養
六、油萊葉片培養
第九節 高粱組織與細胞培養技術
一、高粱花藥培養
二、高粱幼穗培養
三、高粱幼胚培養
四、高粱原生質體培養
五、高粱莖端再生苗分化培養
第十節 向日葵組織與細胞培養技術
一、向日葵下胚軸培養
二、向日葵子葉和子葉節培養
三、向日葵未成熟胚培養
第十一節 花生組織與細胞培養技術
一、花生子葉培養
二、花生幼葉培養
三、花生胚芽培養
四、花生胚軸培養
五、花生莖尖培養
六、花生胚小葉懸浮培養
第十二節 蕎麥組織與細胞培養技術
一、蕎麥子葉與下胚軸培養
二、普通蕎麥幼莖培養
三、蕎麥葉柄培養
四、蕎麥懸浮細胞培養
五、普通蕎麥莖段快速繁殖
第十三節 大麥組織與細胞培養技術
一、大麥幼胚培養
二、大麥成熟胚培養
三、大麥花藥培養
四、大麥細胞懸浮培養
第十四節 棉花組織與細胞培養技術
一、棉花下胚軸培養
二、棉花子葉培養
三、棉花未受精胚珠培養
四、棉花受精胚珠（幼胚）培養
附錄
參考文獻

《主要農作物組織與細胞培養技術/高等農林院校實驗實訓教材》：
植物組織與細胞培養是以植物組織或細胞離體操作為基礎的學科，又稱為植物離體培養。它是指在無菌和人工控制條件下，利用合適的培養基，對植物的器官、組織、細胞或原生質體進行離體操作和培養，使其按照人們的意愿生長、增殖或再生的一門生物技術學科。一、基本概念植物細胞全能性：任何具備完整細胞核的植物細胞，都具有形成一個完整植株所必需的遺傳信息，在供給一定條件后，都具有獨立發育成胚胎和植株的潛能。植物細胞的全能性是植物組織與細胞培養的理論基礎。愈傷組織：通常是指植物受到機械、動物或微生物等傷害后，創傷部位細胞脫分化而不斷形成的松散排列、無特定結構和功能的非器官化組織。離體培養的外植體通常產生愈傷組織。愈傷組織的形成是已分化細胞脫分化的結果，愈傷組織形成后，通過器官發生或體細胞胚胎發生可實現植株再生。脫分化和再分化：脫分化也稱去分化，是指已分化的細胞經過誘導后失去其特有的結構和功能而轉變成未分化細胞的過程。再分化是指在離體的條件下無序生長的脫分化的細胞在適當條件下重新進入有序生長和分化狀態的過程。離體培養植物組織或細胞再生植株就是通過細胞脫分化和再分化實現的。植物的器官培養：是指對植物體的各種器官的離體培養，包括根、莖、葉、花器（花藥、子房、花瓣、花蕾等）和果實等。器官培養內容廣泛，應用的范圍最廣。植物離體微繁及脫毒：植物離體微繁是指利用植物組織培養方法對分離的植物外植體進行離體培養，通過誘導外植體的增殖在短期內獲得遺傳性一致的大量再生個體的技術。植物離體脫毒是指利用組織培養技術對幼嫩的分生組織進行培養以獲得脫毒苗。植物離體微繁與脫毒技術目前已成為一些重要經濟作物及名貴花卉無毒苗的獲得及快速繁育方式。植物的幼胚培養和成熟胚培養：幼胚培養是指對發育早期胚或未成熟胚的培養，即供給一定的培養條件，使幼胚逐步發育成成熟胚，并進一步發育成小植株的技術。成熟胚培養是指對發育成熟的種子胚的離體培養。離體幼胚培養是遠緣雜交中進行雜種胚拯救的有效手段。另外，成熟胚、幼胚及其所誘導的胚性愈傷組織是轉基因的良好受體，因而被廣泛應用于植物轉基因研究中。植物的花藥和花粉培養：花藥培養是指將花粉發育到一定階段的完整花藥接種到培養基上，通過誘導花藥中小孢子的雄核發育，形成單倍體再生植株的技術。花粉培養是指在離體培養條件下，對植物游離花粉細胞進行培養，通過誘導花粉細胞（小孢子）的雄核發育產生單倍體再生植株的技術。花藥和花粉培養的主要目的是為了獲得植物單倍體。植物的細胞培養：是指對游離的植物細胞或細胞小聚體進行離體無菌培養，獲得大量均一細胞群體或再生植株的技術。細胞培養方式包括細胞懸浮培養、單細胞培養及細胞固定化培養。目前細胞培養主要應用于植物細胞次生物質的生產和單細胞無性系的建立，為植物細胞的生長、繁殖、分化及體細胞突變體的篩選提供重要的研究系統。植物的原生質體培養：是指從植物細胞中分離出原生質體，經過離體培養，使其分裂、增殖進而分化成完整植株的技術。植物原生質體培養技術的建立和發展，為植物體細胞雜交技術、外源基因導入技術及細胞拆合技術等應用于植物遺傳改良提供了重要的技術手段。二、基本設備（一）基本操作設備超凈工作臺、細胞融合儀、基因槍。（二）滅菌消毒設備高壓蒸汽滅菌器、高溫干燥箱、細菌過濾器、紫外燈、瓶口封塞。（三）培養設備光照培養箱、人工氣候箱、培養架、搖床（振蕩器）或轉床、生物反應器。（四）常規設備電子天平、顯微鏡、純水儀、酸度計、移液器、冰箱。其他：離心機、真空泵、恒溫箱、血細胞計數板、磁力攪拌器、容量瓶、量筒、燒杯等。（五）培養器皿三角瓶、太空玻璃、果醬瓶、培養皿、試管、角形培養瓶、T型管或L型管、細胞微室、凹型載玻片等。（六）常用器械不銹鋼鑷子、剪刀、解剖刀、鉆孔器、接種針等。三、基本技術（一）洗滌技術1．新器皿的洗滌用1%鹽酸液浸泡一晝夜，再用去污粉浸洗，然后用清水反復沖洗，再用無離子水沖洗3次，干燥后備用。2．污染器皿的洗滌洗滌前，應先在高壓滅菌鍋中滅菌，然后再洗滌。3．油污等嚴重污染的器皿先用堿洗（如先用肥皂水洗除一般臟物），再用自然水充分沖洗后晾干，然后浸泡到鉻酸液中一定時間（洗滌吸管等長器皿，可將洗液放人大缸內，把吸管裝入防酸尼龍絲網袋里，一道置于洗液中浸泡）。浸好后將器皿取出，瀝干洗液，蓋好洗液缸，以免洗液吸水失效。
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