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本書是王金發教授主持的《細胞生物學》立體化教材建設項目的實驗教材。全書包括12章共64個實驗,涵蓋了部分經典的細胞生物學實驗,又新增了一些與現代細胞生物學和分子生物學相關的新技術,內容包括光學顯微鏡技術、電子顯微鏡技術、細胞的形態結構、細胞化學、細胞生理、細胞分裂與染色體畸變、染色體技術與核型分析、細胞和組織培養技術、細胞化學成分的分離、蛋白質及核酸的定位與檢測、細胞工程技術以及流式細胞技術、共聚焦顯微技術、細胞凋亡檢測技術等。
本書可供綜合性大學、農林、醫學、師範院校本科生和研究生的細胞生物學實驗課教學使用,也可作為相關研究人員的參考用書,由於本書實驗內容較多,在使用時可根據自身條件酌情選擇。
本書可供綜合性大學、農林、醫學、師範院校本科生和研究生的細胞生物學實驗課教學使用,也可作為相關研究人員的參考用書,由於本書實驗內容較多,在使用時可根據自身條件酌情選擇。
目次
第一章 光學顯微鏡技術
實驗1 普通光學顯微鏡的構造原理及使用方法
實驗2 特殊顯微鏡的原理和使用
實驗3 顯微攝影技術
實驗4 光學顯微標本的制作技術
第二章 電子顯微鏡技術
實驗5 透射電子顯微鏡
實驗6 透射電子顯微鏡樣品制備
實驗7 掃描電子顯微鏡
實驗8 掃描電子顯微鏡樣品制備
第三章 細胞的形態結構
實驗9 細胞形態結構與幾種細胞器的觀察
實驗10 液泡系和線粒體的活體染色
實驗11 植物細胞骨架的光學顯微鏡觀察
實驗12 細胞骨架的免疫熒光顯示
實驗13 細胞的超微結構
實驗14 細胞的顯微測量
第四章 細胞化學
實驗15 DNA的細胞化學——Feulgen反應
實驗16 RNA的細胞化學——Brachet反應
實驗17 細胞中多糖和過氧化物酶的定位
實驗18 細胞中酸性磷酸酶的定位
實驗19 細胞中堿性磷酸酶的定位
第五章 細胞生理
實驗20 小鼠巨噬細胞吞噬的觀察
實驗21 胞飲作用
實驗22 細胞膜的通透性
實驗23 細胞電泳
第六章 細胞分裂與染色體畸變
實驗24 細胞的無絲分裂與有絲分裂
實驗25 細胞減數分裂
實驗26 環境因素及輻射誘變染色體改組的觀察
第七章 染色體技術與核型分析
實驗27 植物染色體標本的制備和觀察
實驗28 動物骨髓細胞染色體標本的制備
實驗29 人體外周血淋巴細胞培養與染色體標本制備
實驗30 人類染色體G帶技術
實驗31 植物染色體分帶技術
實驗32 人類體細胞染色體組型分析
實驗33 染色體核仁組織區(NOR)的顯示
實驗34 姊妹染色單體色差分析技術
第八章 細胞和組織培養技術
實驗35 植物組織培養技術
實驗36 原生質體的分離和培養
實驗37 植物體細胞雜交——原生質體的融合
實驗38 動物細胞原代培養
實驗39 傳代細胞培養
實驗40 細胞的凍存與復蘇
實驗41 哺乳動物胚胎干細胞的培養和體外分化
第九章 細胞化學成分的分離
實驗42 細胞核與線粒體的分級分離
實驗43 完整葉綠體的分離
實驗44 中期染色體的分離純化
實驗45 動物細胞基因組DNA的提取
實驗46 植物基因組DNA的提取
實驗47 細胞和組織總RNA的提取
實驗48 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA片段
第十章 蛋白質、核酸的定位與檢測
實驗49 地高辛標記探針的Southern 雜交
實驗50 放射性標記探針的Northern雜交
實驗51 Western 印跡法(蛋白質印跡法)
實驗52 蛋白質與蛋白質相互作用檢測——酵母雙雜交篩選
實驗53 原位PCR
實驗54 用ABC法進行蛋白質的免疫定位
第十一章 細胞工程技術
實驗55 雞血細胞的體外融合
實驗56 磷酸鈣沉淀法將DNA導入細胞
實驗57 電穿孔和電融合技術
實驗58 反轉錄病毒載體介導的基因轉導
實驗59 細胞顯微注射技術
第十二章 其他技術
實驗60 細胞放射自顯影
實驗61 流式細胞技術
實驗62 熒光標記技術
實驗63 細胞凋亡的檢測
實驗64 共聚焦顯微技術及去旋技術
主要參考文獻
附錄
附錄1 一些常用的換算
附錄2 常用試劑及溶液的配制和使用
附錄3 光學儀器保養與清潔的要點
附錄4 常用縮寫匯編
附錄5 常用細菌培養基的配方
實驗1 普通光學顯微鏡的構造原理及使用方法
實驗2 特殊顯微鏡的原理和使用
實驗3 顯微攝影技術
實驗4 光學顯微標本的制作技術
第二章 電子顯微鏡技術
實驗5 透射電子顯微鏡
實驗6 透射電子顯微鏡樣品制備
實驗7 掃描電子顯微鏡
實驗8 掃描電子顯微鏡樣品制備
第三章 細胞的形態結構
實驗9 細胞形態結構與幾種細胞器的觀察
實驗10 液泡系和線粒體的活體染色
實驗11 植物細胞骨架的光學顯微鏡觀察
實驗12 細胞骨架的免疫熒光顯示
實驗13 細胞的超微結構
實驗14 細胞的顯微測量
第四章 細胞化學
實驗15 DNA的細胞化學——Feulgen反應
實驗16 RNA的細胞化學——Brachet反應
實驗17 細胞中多糖和過氧化物酶的定位
實驗18 細胞中酸性磷酸酶的定位
實驗19 細胞中堿性磷酸酶的定位
第五章 細胞生理
實驗20 小鼠巨噬細胞吞噬的觀察
實驗21 胞飲作用
實驗22 細胞膜的通透性
實驗23 細胞電泳
第六章 細胞分裂與染色體畸變
實驗24 細胞的無絲分裂與有絲分裂
實驗25 細胞減數分裂
實驗26 環境因素及輻射誘變染色體改組的觀察
第七章 染色體技術與核型分析
實驗27 植物染色體標本的制備和觀察
實驗28 動物骨髓細胞染色體標本的制備
實驗29 人體外周血淋巴細胞培養與染色體標本制備
實驗30 人類染色體G帶技術
實驗31 植物染色體分帶技術
實驗32 人類體細胞染色體組型分析
實驗33 染色體核仁組織區(NOR)的顯示
實驗34 姊妹染色單體色差分析技術
第八章 細胞和組織培養技術
實驗35 植物組織培養技術
實驗36 原生質體的分離和培養
實驗37 植物體細胞雜交——原生質體的融合
實驗38 動物細胞原代培養
實驗39 傳代細胞培養
實驗40 細胞的凍存與復蘇
實驗41 哺乳動物胚胎干細胞的培養和體外分化
第九章 細胞化學成分的分離
實驗42 細胞核與線粒體的分級分離
實驗43 完整葉綠體的分離
實驗44 中期染色體的分離純化
實驗45 動物細胞基因組DNA的提取
實驗46 植物基因組DNA的提取
實驗47 細胞和組織總RNA的提取
實驗48 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA片段
第十章 蛋白質、核酸的定位與檢測
實驗49 地高辛標記探針的Southern 雜交
實驗50 放射性標記探針的Northern雜交
實驗51 Western 印跡法(蛋白質印跡法)
實驗52 蛋白質與蛋白質相互作用檢測——酵母雙雜交篩選
實驗53 原位PCR
實驗54 用ABC法進行蛋白質的免疫定位
第十一章 細胞工程技術
實驗55 雞血細胞的體外融合
實驗56 磷酸鈣沉淀法將DNA導入細胞
實驗57 電穿孔和電融合技術
實驗58 反轉錄病毒載體介導的基因轉導
實驗59 細胞顯微注射技術
第十二章 其他技術
實驗60 細胞放射自顯影
實驗61 流式細胞技術
實驗62 熒光標記技術
實驗63 細胞凋亡的檢測
實驗64 共聚焦顯微技術及去旋技術
主要參考文獻
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附錄1 一些常用的換算
附錄2 常用試劑及溶液的配制和使用
附錄3 光學儀器保養與清潔的要點
附錄4 常用縮寫匯編
附錄5 常用細菌培養基的配方
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