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本書作者克里斯托弗·豪是劍橋大學植物與微生物生物化學專業的教授,教授分子生物學達20年。本書是對第一版的完全更新,反映了基因克隆和操作領域最新的進展,對重組DNA技術進行了全面而簡潔的介紹:首先闡釋了生物化學的基本原理;然后介紹了PCR以及使用大腸桿菌宿主和質粒、噬菌體和雜合載體進行克隆;之后介紹了文庫的構建和篩選,以及如何對克隆化序列進行改造、滅活和表達;最后討論了在許多其他生物中進行的遺傳操作,包括細菌、真菌、藻類,以及植物、昆蟲和哺乳動物。本書是為要使用重組DNA技術的高年級本科生、研究生和科研工作者而作,重點放在特定類型克隆載體上,以幫助讀者理解并能夠在新的實驗狀態下提出適當的策略。本書還介紹了一系列“現實的”生物學問題,以使讀者能夠評估自己對知識的理解并準備考試。
目次
譯者序
第二版前言
第一版前言
第1章 工具
1.1 前言
1.2 切割
1.3 修飾
1.4 連接
1.5 轉化
1.6 從大腸桿菌中純化質粒DNA
1.7 核酸的凝膠電泳
1.8 寡核苷酸合成
1.9 微陣列
第2章 聚合酶鏈反應
2.1 基本技術
2.2 預防措施和缺點
2.3 改良
第3章 簡單克隆
3.1 基本實驗
3.2 載體、轉化和宿主
3.3 修飾
3.4 接頭、銜接子和序列盒
第4章 用于大腸桿菌的其他載體系統
4.1 前言
4.2 BAC載體
4.3 M13噬菌體載體
4.4 入噬菌體
4.5 黏粒
4.6 Mu噬菌體
4.7 P1噬菌體
第5章 文庫構建
5.1 前言
5.2 基因組文庫
5.3 cDNA文庫
5.4 專業文庫
第6章 文庫篩選
6.1 前言
6.2 數據庫篩選
6.3 編碼功能的實驗篩選
6.4 其他功能的篩選:報告基因
第7章 改造與誘變
7.1 前言
7.2 基於限制性內切核酸酶的方法
7.3 寡核苷酸定向誘變
7.4 選擇正確的突變
7.5 滅活基因
第8章 克隆化DNA的應用
8.1 作為DNA使用
8.2 RNA的合成
8.3 蛋白質的合成
8.4 體外翻譯
8.5 體內表達
8.6 研究基因功能:報告基因和標簽
第9章 使用其他生物
9.1 前言
9.2 細菌
9.3 釀酒酵母
9.4 其他真菌
9.5 藻類
9.6 維管植物
9.7 細胞器轉化
9.8 秀麗隱桿線蟲
9.9 昆蟲
9.10 哺乳動物
第10章 實例
10.1 前言
參考文獻
索引
第二版前言
第一版前言
第1章 工具
1.1 前言
1.2 切割
1.3 修飾
1.4 連接
1.5 轉化
1.6 從大腸桿菌中純化質粒DNA
1.7 核酸的凝膠電泳
1.8 寡核苷酸合成
1.9 微陣列
第2章 聚合酶鏈反應
2.1 基本技術
2.2 預防措施和缺點
2.3 改良
第3章 簡單克隆
3.1 基本實驗
3.2 載體、轉化和宿主
3.3 修飾
3.4 接頭、銜接子和序列盒
第4章 用于大腸桿菌的其他載體系統
4.1 前言
4.2 BAC載體
4.3 M13噬菌體載體
4.4 入噬菌體
4.5 黏粒
4.6 Mu噬菌體
4.7 P1噬菌體
第5章 文庫構建
5.1 前言
5.2 基因組文庫
5.3 cDNA文庫
5.4 專業文庫
第6章 文庫篩選
6.1 前言
6.2 數據庫篩選
6.3 編碼功能的實驗篩選
6.4 其他功能的篩選:報告基因
第7章 改造與誘變
7.1 前言
7.2 基於限制性內切核酸酶的方法
7.3 寡核苷酸定向誘變
7.4 選擇正確的突變
7.5 滅活基因
第8章 克隆化DNA的應用
8.1 作為DNA使用
8.2 RNA的合成
8.3 蛋白質的合成
8.4 體外翻譯
8.5 體內表達
8.6 研究基因功能:報告基因和標簽
第9章 使用其他生物
9.1 前言
9.2 細菌
9.3 釀酒酵母
9.4 其他真菌
9.5 藻類
9.6 維管植物
9.7 細胞器轉化
9.8 秀麗隱桿線蟲
9.9 昆蟲
9.10 哺乳動物
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