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生物化學實驗課程為清華大學精品課程，《生物化學實驗指導(第2版)》是清華大學生命科學學院生物化學教研室多年實驗教學經驗的結晶。本教材分為理論和實驗兩大部分。理論部分論述了生物大分子制備、層析技術、電泳技術、離心技術、分光光度技術、免疫化學技術等內容，補充了新的蛋白質技術；實驗部分，除經典的生物化學實驗外，增加了生物化學綜合大實驗的內容，并更新了生物軟件在生物化學實驗中的應用部分內容。生物化學實驗的英文參考資料及優秀學生實驗報告舉例見所附光盤。
修訂再版后的教材，刪除了陳舊、過時的內容，補充了一些新內容，理論部分和實驗部分結合更緊密，更加注重培養學生的動手能力、獨立思考問題的能力，有利于學生科研能力的提高。
本教材內容新穎、科學，實用性強，可供全國高等院校生物化學及相關學科專業學生和科研人員參考。
修訂再版后的教材，刪除了陳舊、過時的內容，補充了一些新內容，理論部分和實驗部分結合更緊密，更加注重培養學生的動手能力、獨立思考問題的能力，有利于學生科研能力的提高。
本教材內容新穎、科學，實用性強，可供全國高等院校生物化學及相關學科專業學生和科研人員參考。
目次
理論部分
1 生物大分子的制備
1.1 概述
1.2 生物大分子制備的前處理
1.2.1 生物材料的選擇
1.2.2 細胞的破碎
1.2.3 生物大分子的提取
1.3 生物大分子的分離純化
1.3.1 沉淀法
1.3.2 透析
1.3.3 超濾
1.3.4 冰凍干燥
1.3.5 樣品的保存
1.3.6 分離純化方法的選擇
2 層析技術
2.1 層析技術概述
2.1.1 引言
2.1.2 層析的基本理論
2.1.3 層析的基本概念
2.1.4 層析法的分類
2.1.5 柱層析的基本裝置及基本操作
2.2 凝膠層析
2.2.1 簡介
2.2.2 凝膠層析的基本原理
2.2.3 凝膠層析的基本概念
2.2.4 凝膠的種類和性質
2.2.5 凝膠的選擇、處理和保存
2.2.6 凝膠層析的基本操作
2.2.7 凝膠層析的應用
2.3 離子交換層析
2.3.1 簡介
2.3.2 基本原理
2.3.3 離子交換劑的種類和性質
2.3.4 離子交換劑的選擇、處理和保存
2.3.5 離子交換層析的基本操作
2.3.6 陰離子交換樹脂Q-Sepharose
2.3.7 離子交換層析的應用
2.4 親和層析
2.4.1 簡介
2.4.2 親和層析的基本原理
2.4.3 親和吸附劑
2.4.4 親和層析的基本操作
2.4.5 親和層析的應用
2.5 高效液相層析（HPLC）
2.5.1 簡介
2.5.2 HPLC的特點
2.5.3 HPLC的分類
3 電泳技術
3.1 發展簡史
3.2 電泳基本原理
3.3 影響電泳分離的主要因素
3.4 電泳的分類
3.5 紙電泳和醋酸纖維薄膜電泳
3.6 瓊脂糖凝膠電泳
3.7 聚丙烯酰胺凝膠電泳
3.8 SDS-PAGE
3.9 梯度凝膠電泳
3.10 等電聚焦電泳
3.11 二維聚丙烯酰胺凝膠電泳
3.12 蛋白質的檢測、鑑定及回收
3.13 蛋白質印跡
3.14 毛細管電泳
3.15 芯片毛細管電泳
4 離心技術
4.1 基本原理
4.2 離心機的主要構造和類型
4.3 超速離心技術
4.4 離心操作的注意事項
5 分光光度技術
5.1 基本原理
5.2 分光光度計的組成和構造
5.3 分光光度法在生化實驗技術中的應用
6 免疫化學技術
6.1 免疫化學技術簡介
6.2 抗原的免疫原性和專一性
6.3 抗體的結構和功能
6.4 抗原抗體的結合
6.5 動物的常規免疫
6.6 雙向免疫擴散及免疫電泳
6.7 酶聯免疫吸附法（EUSA）
6.7.1 間接法測抗體
6.7.2 雙抗體夾心法
6.7.3 雙位點一步法
6.7.4 競爭法
6.7.5 捕獲法測lgM抗體
7 其他新技術概覽
7.1 熒光技術
7.1.1 熒光產生機制
7.1.2 天然熒光生色團和熒光探針
7.1.3 熒光共振能量轉移
7.2 等溫滴定微量熱技術
7.2.1 等溫滴定微量熱（ITC）簡介
7.2.2 ITC的優點
7.2.3 ITC的主要應用
7.3 生物大分子相互作用分析
7.3.1 表面等離子共振技術的原理
7.3.2 Biacore分析系統的組成
7.3.3 Biacore的工作原理
7.3.4 Biacore的應用領域
7.4 質譜技術
7.4.1 質譜的基本原理
7.4.2 質譜的分類
7.4.3 質譜的應用
7.5 圓二層析技術（CD）
7.5.1 圓二色的基本原理
7.5.2 圓二色儀
7.5.3 圓二色技術的應用
7.6 蛋白質測序技術
7.6.1 N端測序
7.6.2 C端測序
實驗部分
實驗1 蛋白質含量測定法
1.微量凱氏（Kjeldahl）定氮法
2.雙縮脲法（Biuret.法）
3.Folin一酚試劑法（Lowry法）
4.改良的簡易Folin一酚試劑法
5.考馬斯亮藍法（Bradford法）
6.紫外吸收法
實驗2 凝膠層析法測定蛋白質分子質量
1.實驗目的
2.實驗原理
3.器材與試劑
4.實驗操作
實驗3 等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
1.實驗目的
2.實驗原理
3.器材和試劑
4.溶液配制
5.操作步驟
6.數據處理
……
附錄
參考文獻
1 生物大分子的制備
1.1 概述
1.2 生物大分子制備的前處理
1.2.1 生物材料的選擇
1.2.2 細胞的破碎
1.2.3 生物大分子的提取
1.3 生物大分子的分離純化
1.3.1 沉淀法
1.3.2 透析
1.3.3 超濾
1.3.4 冰凍干燥
1.3.5 樣品的保存
1.3.6 分離純化方法的選擇
2 層析技術
2.1 層析技術概述
2.1.1 引言
2.1.2 層析的基本理論
2.1.3 層析的基本概念
2.1.4 層析法的分類
2.1.5 柱層析的基本裝置及基本操作
2.2 凝膠層析
2.2.1 簡介
2.2.2 凝膠層析的基本原理
2.2.3 凝膠層析的基本概念
2.2.4 凝膠的種類和性質
2.2.5 凝膠的選擇、處理和保存
2.2.6 凝膠層析的基本操作
2.2.7 凝膠層析的應用
2.3 離子交換層析
2.3.1 簡介
2.3.2 基本原理
2.3.3 離子交換劑的種類和性質
2.3.4 離子交換劑的選擇、處理和保存
2.3.5 離子交換層析的基本操作
2.3.6 陰離子交換樹脂Q-Sepharose
2.3.7 離子交換層析的應用
2.4 親和層析
2.4.1 簡介
2.4.2 親和層析的基本原理
2.4.3 親和吸附劑
2.4.4 親和層析的基本操作
2.4.5 親和層析的應用
2.5 高效液相層析（HPLC）
2.5.1 簡介
2.5.2 HPLC的特點
2.5.3 HPLC的分類
3 電泳技術
3.1 發展簡史
3.2 電泳基本原理
3.3 影響電泳分離的主要因素
3.4 電泳的分類
3.5 紙電泳和醋酸纖維薄膜電泳
3.6 瓊脂糖凝膠電泳
3.7 聚丙烯酰胺凝膠電泳
3.8 SDS-PAGE
3.9 梯度凝膠電泳
3.10 等電聚焦電泳
3.11 二維聚丙烯酰胺凝膠電泳
3.12 蛋白質的檢測、鑑定及回收
3.13 蛋白質印跡
3.14 毛細管電泳
3.15 芯片毛細管電泳
4 離心技術
4.1 基本原理
4.2 離心機的主要構造和類型
4.3 超速離心技術
4.4 離心操作的注意事項
5 分光光度技術
5.1 基本原理
5.2 分光光度計的組成和構造
5.3 分光光度法在生化實驗技術中的應用
6 免疫化學技術
6.1 免疫化學技術簡介
6.2 抗原的免疫原性和專一性
6.3 抗體的結構和功能
6.4 抗原抗體的結合
6.5 動物的常規免疫
6.6 雙向免疫擴散及免疫電泳
6.7 酶聯免疫吸附法（EUSA）
6.7.1 間接法測抗體
6.7.2 雙抗體夾心法
6.7.3 雙位點一步法
6.7.4 競爭法
6.7.5 捕獲法測lgM抗體
7 其他新技術概覽
7.1 熒光技術
7.1.1 熒光產生機制
7.1.2 天然熒光生色團和熒光探針
7.1.3 熒光共振能量轉移
7.2 等溫滴定微量熱技術
7.2.1 等溫滴定微量熱（ITC）簡介
7.2.2 ITC的優點
7.2.3 ITC的主要應用
7.3 生物大分子相互作用分析
7.3.1 表面等離子共振技術的原理
7.3.2 Biacore分析系統的組成
7.3.3 Biacore的工作原理
7.3.4 Biacore的應用領域
7.4 質譜技術
7.4.1 質譜的基本原理
7.4.2 質譜的分類
7.4.3 質譜的應用
7.5 圓二層析技術（CD）
7.5.1 圓二色的基本原理
7.5.2 圓二色儀
7.5.3 圓二色技術的應用
7.6 蛋白質測序技術
7.6.1 N端測序
7.6.2 C端測序
實驗部分
實驗1 蛋白質含量測定法
1.微量凱氏（Kjeldahl）定氮法
2.雙縮脲法（Biuret.法）
3.Folin一酚試劑法（Lowry法）
4.改良的簡易Folin一酚試劑法
5.考馬斯亮藍法（Bradford法）
6.紫外吸收法
實驗2 凝膠層析法測定蛋白質分子質量
1.實驗目的
2.實驗原理
3.器材與試劑
4.實驗操作
實驗3 等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
1.實驗目的
2.實驗原理
3.器材和試劑
4.溶液配制
5.操作步驟
6.數據處理
……
附錄
參考文獻
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