基因工程原理與實驗指導（簡體書）

《基因工程原理與實驗指導(高校教材)》的特點是：①適應理論學時縮短的需要，將內容減少。現在的大學生基本上在第四學年進入實習，理論學習安排在前三個學年，所以理論學時減少，而目前所用教材內容太多，學生沒時間學習。②將基因工程原理和實驗內容有機結合在一起。多數教材將大部分精力集中在理論知識的講述方面，而基因工程是一門實驗性學科，沒有實驗導致學生學習知識不全面。③加入最新的知識內容，適應進一步學習和工作的需要。

第一部分 基因工程原理
第一章 緒論
第一節 引言
一、基因工程定義
二、基因工程發展史
第二節 基因工程的研究內容
一、技術路線
二、研究內容
第三節 基因工程的應用
一、基因工程藥物
二、轉基因動物
三、轉基因植物
四、其他方面的應用
第四節 基因工程的安全性問題
本章問題

第二章 DNA重組工具酶
第一節 限制性內切酶
一、限制性酶的類型和命名
二、限制性酶的特性
三、酶切末端的類型
四、限制性酶的切割方式
五、影響限制性酶活力的因素
六、限制性酶的酶切反應體系
七、限制性酶的特殊類型
第二節 基因工程操作其他工具酶
一、連接酶
二、末端轉移酶
三、堿性磷酸酶
四、多聚核苷酸激酶T4PNK
五、T7DNA聚合酶
六、逆轉錄酶
本章問題

第三章 基因工程的載體
第一節 質粒的一般特性
一、質粒的生物學特性
二、質粒DNA的構型
三、質粒DNA的提取
第二節 常用的質粒克隆載體
一、pBR322質粒
二、pUCl8／19質粒
三、TA克隆載體
第三節 常用的質粒表達載體
一、原核表達載體的表達元件
二、常用的原核表達載體
三、真核表達載體
第四節 噬菌體載體和柯斯質粒載體
一、噬菌體載體
二、柯斯質粒載體
本章問題

第四章 聚合酶鏈式反應
第一節 PCR原理
一、常規PCR
二、定量PCR
第二節 PCR操作及引物設計
一、PCR的反應體系
二、PCR擴增程序
第三節 引物設計原則及引物合成
一、引物設計原則
二、引物合成反應
第四節 電泳分離及純化
本章問題

第五章 基因制備
第一節 直接分離基因
一、限制性內切酶分離法
二、雙抗免疫分離法
三、根據蛋白質克隆基因法
四、同源克隆法
五、T-DNA插入失活法
第二節 PCR法擴增基因
一、套式PCR
二、錨定PCR
三、長程PCR
四、反向PCR
五、逆轉錄PCR
六、易錯PCR
七、融合PCR
第三節 構建基因組文庫法
一、基因組文庫及cDNA文庫概念
二、構建基因組文庫的步驟
三、基因組文庫的質量評價
第四節 噬菌體表面展示技術
一、噬菌體表面展示的概念
二、表面展示載體的原理
三、表面展示技術的不足
四、其他展示方法
第五節 酵母雙雜交技術
一、酵母雙雜交的概念
二、酵母雙雜交的原理
三、酵母雙雜交系統的組成
四、雙雜交的步驟
第六節 化學合成法
一、基因的化學合成
二、化學合成方法
本章問題

第六章 DNA重組及導入受體細胞
第一節 DNA重組
一、DNA的連接反應
二、連接反應的注意事項
三、平末端的連接
第二節 重組DNA導入原核生物
一、感受態細胞的制備及轉化
二、轉化子的檢測
第三節 重組DNA導入植物細胞
一、植物受體細胞類型及其特性
二、植物細胞的基因轉化方法
三、轉基因植物的篩選和鑑定
第四節 重組DNA導入動物細胞
一、動物細胞的特性
二、動物細胞的基因轉化方法
本章問題

第七章 外源基因的表達
第一節 外源基因在大腸桿菌中的表達
一、常見的大腸桿菌表達系統
二、外源基因在大腸桿菌中表達的形式
三、外源基因在大腸桿菌中高效表達的策略
第二節 外源基因在酵母中的表達
一、酵母表達載體的基本結構
二、酵母表達系統的宿主
三、影響外源基因在酵母中表達的因素
本章問題

第八章 基因工程應用及其安全性
第一節 基因工程藥物
一、基因工程激素類藥物
二、基因工程細胞因子類藥物
三、基因工程抗體
四、基因工程疫苗
第二節 轉基因植物
一、抗蟲害轉基因植物
二、抗病毒轉基因植物
三、抗逆轉基因植物
四、提高植物的品質
第三節 轉基因動物
一、建立人類疾病的動物模型
二、作為生物反應器
三、作為器官移植的動物供體
四、培育性狀優良的家畜家禽
五、基因功能與調控的基礎研究
第四節 基因治療
一、基因治療的策略
第二部分 基因工程實驗指導
第一章 實驗相關知識
第二章 基因工程實驗原則
第三章 實驗內容及操作方案
第四章 基因工程操作中容易出現的錯誤及對策