組織化學與免疫組織化學（簡體書）

《衛生部"十一五"規劃教材·組織化學與免疫組織化學》為便于學生自學，采用圖解和圖片的形式幫助學生理解和體會其重要內容。本教材是在衛生部全國高等院校醫學研究生教材建設研究會組織領導下，為臨床醫學、基礎醫學、預防醫學、藥學和護理等專業的碩士生、博士生及相應的醫藥工作者而編寫的。它以實用、簡明、理論與實踐緊密結合為特點，以培養研究生基本實驗技能、提高科研能力和啟發創新為目的，力爭在研究生培養中起導航作用。主要內容包括：組織化學與免疫組織化學染色樣品制備；免疫組織化學技術；原位雜交組織化學；顯微攝影技術等。

《衛生部"十一五"規劃教材·組織化學與免疫組織化學》由人民衛生出版社出版。

本教材是在衛生部全國高等院校醫學研究生教材建設研究會組織領導下，為臨床醫學、基礎醫學、預防醫學、藥學和護理等專業的碩士生、博士生及相應的醫藥工作者而編寫的。它以實用、簡明、理論與實踐緊密結合為特點，以培養研究生基本實驗技能、提高科研能力和啟發創新為目的，力爭在研究生培養中起導航作用。
組織化學與免疫組織化學技術是醫學與生命科學研究中重要研究手段之一，其研究方法種類繁多。為使研究生能夠掌握基本方法，并在實際工作中觸類旁通，靈活運用所學技能，我們在各章內容中均選擇常用研究方法，并結合研究工作中常遇到的問題盡可能詳細描述和深入討論，因而不同于同類參考書。由于這門技術實踐性頗強，僅學習理論猶如紙上談兵，故我們專為研究生實驗課設計了十個基本技能實驗，可供各院校根據不同情況選擇使用。為便于學生自學，采用圖解和圖片的形式幫助學生理解和體會其重要內容。我們還在大多數章的後面以插入科學史話和應用舉例的方式講述科學家和編者們的親身科研經歷，以引導學生學會如何設計和實施選題，希望讀者不但能從中得到啟迪，而且能感悟到科學研究所需要的熱情、好奇、勤奮和科學家所具有的堅忍不拔的信念和百折不撓的品格。
本教材在編寫過程中，得到同行專家徐輝、蘇學今和王芯蕊的幫助，也得到了許多博士、碩士研究生的支持和幫助，如第二三軍醫大學肖嵐和于彬；重慶醫科大學李琛、盧偉、徐瑜、楊姝和陳林；安徽醫科大學胡向陽等，在此向他們表示衷心地感謝。
由于本教材編寫時間較短，難免會出現疏漏和不妥，真誠歡迎同行專家和廣大師生批評指正，并由衷地期待這本教材能為廣大研究生的創新提供探索、挖掘新知識的工具與技能，能為提高研究生的科研能力作出貢獻。

第一章 緒論
第一節 組織化學發展的基礎
一、細胞生物學發展與組織化學
二、生物化學發展與組織化學
三、免疫學發展與組織化學
四、分子生物學發展與組織化學
第二節 組織化學發展簡史
一、組織化學的興起
二、現代組織化學的發展
三、我國組織化學發展概況
第三節 組織化學技術基本要求
一、組織化學的分支和分類
二、組織化學技術的基本要求

第二章 組織化學與免疫組織化學染色樣品制備
第一節 取材
一、組織標本取材
二、細胞標本取材
(一)培養細胞
(二)涂片法
第二節 固定
一、組織和細胞的固定方法
(一)浸潤法
(二)灌流固定法
二、常用固定劑和固定方法
(一)組織常用固定劑和固定方法
(二)培養細胞常用固定劑和固定方法
第三節 包埋和切片
一、石蠟包埋
(一)包埋前脫水
(二)透明
(三)浸蠟
(四)包埋
(五)修塊
二、切片
(一)石蠟切片
(二)冰凍切片
(三)振動切片
三、防脫片處理步驟
(一)載玻片和蓋玻片的處理
(二)黏附劑的使用
(三)免疫組織化學染色中常見脫片原因科學史話
——幽門螺桿菌與胃潰瘍

第三章 組織化學
第一節 核酸組織化學
一、Feulgen反應
(一)原理
(二)Schiff液的配制
(三)Feulgen反應步驟
二、?啶橙染色
(一)?啶橙區分活細胞DNA和RNA的熒光組織化學染色法
(二)?啶橙原位區分組織細胞DNA和RNA的熒光組織化學染色法
三、Hoechst33258染色
四、DAPI染色
五、溴化乙啶和碘化丙啶染色法
(一)溴化乙啶染色
(二)碘化丙啶染色
第二節 脂類組織化學
一、乙醇蘇丹黑B染色法
(一)染色程序
(二)注意事項
二、油紅O染色法
(一)油紅O染液的配制
(二)染色程序
第三節 ?組織化學
一、?組織化學的基本原理及一般原則
(一)?組織化學的基本原理
(二)?顯示方法
(三)?組織化學對組織處理的基本要求
二、常用?組織化學染色方法
(一)磷酸?
(二)三磷酸腺??
(三)羧酸酯水解?
(四)氧化?和脫氫?
(五)一氧化氮合?
第四節 凝集素組織化學
一、凝集素的標記物
二、染色程序
(一)FITC標記凝集素的組織化學染色程序
(二)辣根過氧化物?標記凝集素的組織化學染色程序
(三)生物素標記凝集素的組織化學染色程序
第五節 熒光組織化學
一、組織細胞熒光分類
(一)自發熒光
(二)誘發熒光
(三)?促熒光
(四)熒光染色
(五)免疫熒光
二、生物胺熒光組織化學
(一)FalckHillarp甲醛誘發熒光法
(二)乙醛酸誘發生物單胺熒光法
(三)鄰苯二醛顯示組胺熒光法科學史話——周期蛋白的發現

第四章 免疫組織化學技術
第一節 免疫組織化學基本原理
一、直接法
二、間接法
三、親和免疫組織化學
(一)親和素一生物素一過氧化物?復合物法
(二)鏈霉菌抗生物素蛋白一過氧化物?法
第二節 免疫組織化學染色步驟
一、SABC法免疫組織化學染色步驟
(一)石蠟切片免疫組織化學染色
(二)冰凍切片免疫組織化學染色
(三)培養細胞免疫細胞化學染色
二、SABC法與其他免疫組織化學染色方法比較
(一)SP法或SAP法
(二)EnVisionTMSystems
(三)MaxVision法
三、免疫組織化學染色結果評價
(一)以抗原表達模式定位
(二)陽性染色結果定量
四、討論
(一)實驗計劃
(二)抗體的稀釋度
(三)滴加抗體注意事項
(四)抗體的保存
(五)對照實驗
(六)免疫組織化學技術應用的基本原則
(七)疑難問題剖析
第三節 免疫組織化學雙重染色
第四節 免疫熒光組織化學技術
一、熒光的基本知識
(一)熒光
(二)熒光物質的特性和種類
二、免疫熒光組織化學基本原理及方法
(一)基本原理
(二)基本方法
三、免疫熒光組織化學染色步驟
(一)直接法
(二)間接法
(三)SABGCy3法
(四)雙重染色法
(五)膜抗原熒光抗體染色法
(六)補體法
(七)熒光抗體再染色法
四、非特異性熒光染色的消除
五、生物熒光顯微鏡
(一)熒光顯微鏡的分類及主要組成
(二)熒光顯微鏡的基本操作及注意事項
六、激光掃描共聚焦顯微鏡
(一)激光掃描共聚焦顯微鏡基本原理
第五章 原們雜交組織化學
第六章 電鏡組織化學與免疫電鏡技術
第七章 組織化學與免疫組織化學定量分析技術
第八章 顯微攝影技術
第九章 組織化學與免疫組織化學實驗指導
附錄一 免疫組織化學染色常用試劑配制
附錄二 原位雜交試劑配制