玉米單倍體育種技術(第2版)（簡體書）

近年來，以生物誘導為基礎的玉米單倍體育種技術已逐步成為玉米育種的關鍵性技術之一。國內外許多研究機構和種業公司均已實現單倍體育種的規模化應用，成為現代玉米育種的核心技術。陳紹江、黎亮、李浩川、徐小煒編著的《玉米單倍體育種技術（第2版）》系統介紹了玉米單倍體育種的基本原理和應用方法，內容涉及單倍體育種技術的發展歷史，單倍體誘導程序和特點，單倍體鑒別與加倍，DH系管理，系統化與工程化構建等。《玉米單倍體育種技術（第2版）》力求兼顧科學性和創新性，為玉米育種者在閱讀和應用時提供參考。

第一章 單倍體的相關概念及產生途徑
第一節 無融合生殖與單倍體的來源
第二節 玉米單倍體產生的主要途徑

第二章 單倍體誘導系的誘導原理與方法
第一節 孤雌生殖誘導系的發展歷史
第二節 誘導系及誘導雜交種選育
第三節 單倍體的誘導程序
第四節 提高誘導效率的方法
第五節 單倍體誘導性狀的遺傳及生物學機理

第三章 單倍體的鑒定方法
第一節 細胞遺傳學方法
第二節 形態學方法
第三節 放射性方法
第四節 遺傳標記法
第五節 油分標記鑒定法與自動化鑒別
第六節 其他鑒定方法

第四章 單倍體的加倍方法
第一節 自然加倍法
第二節 秋水仙素加倍法
第三節 其他細胞分裂抑制劑
第四節 組培加倍及其他加倍技術
第五節 影響化學加倍的因素
第六節 加倍材料的表現與管理

第五章 DH系表現與應用
第一節 DH系世代數標示
第二節 DH系與常規自交系比較
第三節 DH系的遺傳分離
第四節 DH系在育種實踐中的應用

第六章 單倍體育種技術體系的優化
第一節 基礎材料的選擇
第二節 不同育種方法分析
第三節 DH系評價體系的優化

第七章 單倍體育種系統化與工程化
第一節 系統化的技術基礎
第二節 系統分析
第三節 系統優化與應用創新
第四節 單倍體育種技術展望
參考文獻
附件
附件1 植物染色體根尖壓片法
附件2 秋水仙素加倍實驗中的安全注意事項

科學家和育種家研究和實際利用單倍體的首要條件之一是能夠進行單倍體的鑒定，因此單倍體的鑒定技術也是單倍體育種中的關鍵技術之一。眾所周知，玉米單倍體為一倍體，只有一組染色體（n=10），在植株形態上表現為明顯矮小，絕大部分單倍體雄花是高度不育的，只是在少數情況下，單倍體的雄穗會自發產生全部或局部二倍化。早期的時候人們都是通過田間植株形態及育性來判斷植株的倍性。但是由于單倍體的頻率很低，并且這種方法只有將種子種到田間才能進行判斷，人們又通過將一定的遺傳標記導入誘導系中，從而可以在子粒上就能進行判斷是否為單倍體。目前，國內外各育種單位鑒定單倍體的方法主要是依靠子粒顏色標記的表達。但是這種方法仍不十分理想，因為很多材料的標記表達很弱，這樣就導致鑒定效率很低。因此，人們又探索了其他的一些方法，如油分鑒定法、分子標記鑒定法等。此外，即使材料的標記表達非常清楚，目前單倍體的鑒定仍然靠人工鑒定，這是一件非常費時費力的事情，因此如何機械化鑒定單倍體也是今後努力的方向。
盡管目前常用的方法是遺傳標記法，這里仍將可能用于單倍體鑒定的各種方法進行簡單介紹，供大家參考，以期探索出更為有效的方法，從而提高單倍體的鑒定效率。
第一節細胞遺傳學方法
確定倍性最基本和最精確的方法是鑒定植物體細胞或減數分裂細胞中的染色體數目。這種分析可以查明諸如整倍單倍體和非整倍單倍體，以及在單倍體中自發二倍化的程度和由此引起的組織混倍性。染色體計數通常用臨時制片經醋酸洋紅、蘇木精或其他染料染色後進行。
幼嫩的根尖具有大量的分裂旺盛的細胞，是染色體計數的良好材料。針對不同繁殖方式的植物，可以采用不同的方式快速獲得幼根。無性繁殖植物可以用扦插刺激根的形成。對于利用種子繁殖的植物，采用毛巾發芽法或者專用的發芽紙進行發根是非常有效的，在其上可以找到足夠數量的旺盛生長著的根尖。染色體計數過程中，常以中期染色體為研究對象，但在整個細胞分裂周期中，中期細胞數目較少，且染色體因紡錘絲的牽連而緊密地排列在赤道板上，造成染色體計數及識別的困難。在根尖固定之前進行預處理可以改變細胞質的黏度，破壞和抑制紡錘體的形成，有效地積累中期細胞，彌補正常條件下分裂相較少的不足，使染色體適度縮短，并有利于分散。
對某些物種（番茄、甜菜），為了尋找分裂細胞，可以利用幼嫩的小葉子。如果在生長早期，在這些小葉中觀察不到倍數性的特征，那么可以在開花期，在花粉母細胞減數分裂時按胚胎學方法進行鑒定。
利用細胞光度計法分析細胞核中DNA含量同樣是十分精硫的，但其工作性能暫時不能可靠地區分整倍單倍體和非整倍單倍體。如果組織中由于某種原因缺少分裂細胞（例如在分化後或受極端影響後），采用細胞光度計法是適宜的。該方法曾成功地用來鑒定天竺葵和煙草單倍體在組織培養中不同組織的倍性。
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