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在後基因組時代，學界所面臨的主要挑戰之一是如何破解大量的編碼蛋白質的基因功能。在《轉基因技術(原理與實驗方案原著第3版導讀版)(精)》(作者卡特萊特)中，該領域的專家在第2版的基礎上進行了更新和補充，以求能夠詳盡地反映當前基因修飾技術的最新進展。《轉基因技術(原理與實驗方案原著第3版導讀版)(精)》不僅包括基因修飾小鼠制作過程，同時也介紹了其他模式生物的轉基因技術，以及在顯微注射、位點特異性重組系統、冷凍保存等方面的探索和嘗試。本書秉承Springer《分子生物學方法》系列叢書的一貫風格，闡述明晰、便于使用，每章包括對相關問題的介紹，所需材料和試劑的清單，實驗操作的具體步驟，以及常見問題的解決方法和缺陷規避。
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卡特萊特編寫的《轉基因技術(原理與實驗方案原著第3版導讀版)(精)》用大部分的章節介紹了通過將外源DNA注射入受精卵的前核和基于在胚胎干細胞進行同源重組打靶技術的基因修飾小鼠的制作，該部分內容是專門為這本新版《轉基因技術：原理與實驗方案》編寫的，涵蓋了該領域內的最新進展。主要介紹了構建轉基因載體的最佳方案和策略、詳盡的前核顯微注射技術及相關的外科手術操作、維持胚胎干細胞多能性的最佳培養條件以及打靶技術等。第13—15章重點闡述了如何通過將打靶後的胚胎干細胞注射人囊胚或在桑葚胚階段通過細胞聚集獲得嵌合體小鼠的技術手段、將改造後的胚胎重新轉入代孕母鼠體內的外科手術。多年來，Cre／loxP和flp／frt重組系統一直很受人們的歡迎，在16章對這兩個系統及其在小鼠基因組修飾操作中的應用進行了介紹。17章重點介紹了Cre轉基因小鼠的制作和應用。另有一章介紹了大規模的國際間合作以求在基因組中系統性敲除每個基因的工作。本書的其他章節介紹了成功增殖轉基因小鼠所必備的飼養和繁殖技巧、冰凍保存以及從冰凍狀態下復蘇小鼠的技術。
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前言
撰稿人
第一部分 多種模式動物的轉基因技術
1 轉基因果蠅
2 轉基因線蟲
3 利用Tol2轉座子系統制作轉基因斑馬魚
4 轉基因爪蟾
5 利用DNA前核注射制作轉基因大鼠
第二部分 小鼠的轉基因技術
6 細胞類型特異的轉基因小鼠
7 設計轉基因載體和DNA轉入基因組一成功的關鍵
8 過表達轉基因一前核顯微注射
9 基因打靶載體
10 基因捕獲：基因敲除的快速通道
11 小鼠胚胎干細胞的培養
12 打靶胚胎干細胞
13 通過顯微注射獲得嵌合體小鼠
14 通過桑葚胚細胞聚集獲得嵌合體小鼠
15 獲得突變體小鼠相關的手術操作
16 用于小鼠基因組修飾相關的位點特異性重組?
17 Cre轉基因小鼠
18 大規模小鼠基因突變
19 小鼠的繁殖和飼養
20 維持和保存實驗室變異小鼠的生物學方法
Ⅰ：保存突變小鼠株
21 維持和保存實驗室變異小鼠的生物學方法
Ⅱ：復蘇突變小鼠株
索引
撰稿人
第一部分 多種模式動物的轉基因技術
1 轉基因果蠅
2 轉基因線蟲
3 利用Tol2轉座子系統制作轉基因斑馬魚
4 轉基因爪蟾
5 利用DNA前核注射制作轉基因大鼠
第二部分 小鼠的轉基因技術
6 細胞類型特異的轉基因小鼠
7 設計轉基因載體和DNA轉入基因組一成功的關鍵
8 過表達轉基因一前核顯微注射
9 基因打靶載體
10 基因捕獲：基因敲除的快速通道
11 小鼠胚胎干細胞的培養
12 打靶胚胎干細胞
13 通過顯微注射獲得嵌合體小鼠
14 通過桑葚胚細胞聚集獲得嵌合體小鼠
15 獲得突變體小鼠相關的手術操作
16 用于小鼠基因組修飾相關的位點特異性重組?
17 Cre轉基因小鼠
18 大規模小鼠基因突變
19 小鼠的繁殖和飼養
20 維持和保存實驗室變異小鼠的生物學方法
Ⅰ：保存突變小鼠株
21 維持和保存實驗室變異小鼠的生物學方法
Ⅱ：復蘇突變小鼠株
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