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流式細胞術是利用流式細胞儀對單細胞或其他生物粒子進行定量分析和分選。流式細胞術綜合運用電子、激光、計算機以及流體力學等方法,可在極短的時間內高速分析上萬個細胞,同時從一個細胞中測得多個參數。與傳統的熒光顯微鏡檢查相比,具有速度快、精度高、準確性好等優點,成為當代最先進的細胞定量分析技術。
吳長有主編的《流式細胞術的基礎和臨床應用》分別闡述了流式細胞術的原理、技術以及方法等基礎知識,進一步分析了流式細胞術及其分選技術在機體免疫功能、細胞周期、細胞凋亡等基礎研究以及臨床疾病中的應用和最新研究進展。
吳長有主編的《流式細胞術的基礎和臨床應用》分別闡述了流式細胞術的原理、技術以及方法等基礎知識,進一步分析了流式細胞術及其分選技術在機體免疫功能、細胞周期、細胞凋亡等基礎研究以及臨床疾病中的應用和最新研究進展。
目次
第一章 總論
第一節 流式細胞術與流式細胞儀概述
一、流式細胞術概述
二、流式細胞儀
(一)基本結構
(二)工作原理
(三)分析型流式細胞儀介紹
(四)分選型流式細胞儀介紹
第二節 熒光染料的選擇與常用的染色技術
一、熒光染料的特性及其應用
二、常用的染色技術.
(一)細胞免疫熒光染色技術
(二)核酸熒光染色技術.
(三)熒光微球捕獲染色技術
第三節 結果分析與流式圖 第一章 總論
第一節 流式細胞術與流式細胞儀概述
一、流式細胞術概述
二、流式細胞儀
(一)基本結構
(二)工作原理
(三)分析型流式細胞儀介紹
(四)分選型流式細胞儀介紹
第二節 熒光染料的選擇與常用的染色技術
一、熒光染料的特性及其應用
二、常用的染色技術.
(一)細胞免疫熒光染色技術
(二)核酸熒光染色技術.
(三)熒光微球捕獲染色技術
第三節 結果分析與流式圖
一、流式通道
二、流式直方圖
三、流式散點圖
四、流式等高線圖
第四節 流式細胞術的基本操作與技巧
一、標本的采集、運送與儲存
二、標本的處理
(一)獨立細胞樣品制備
(二)免疫器官樣品制備
(三)實體臟器樣品制備
三、熒光素偶聯抗體及其標記方法
(一)熒光素與熒光素偶聯抗體
(二)樣品封閉
(三)熒光素偶聯抗體標記
四、光電倍增管電壓設定
五、對照的設置
(一)陰性對照的設置
(二)FMO對照
(三)陽性對照的設置
六、補償調節
(一)補償調節的原理
(二)調節補償的具體方法
(三)三色和四色分析補償調節方法
(四)影響補償大小的因素
七、閾值設定
(一)減少樣品中死細胞比例的方法
(二)流式分析時區分死細胞和活細胞的方法
八、流式分選模式選擇
(一)純度模式
(二)得率模式(富集模式)
(三)單細胞模式
九、上樣速度控制
(一)流式分析速度控制
(二)流式分選速度控制
十、分選設門基本原則
十一、流式分選基本步驟
第五節 方法學特點
一、單細胞分析
二、定量分析
三、快速性
四、準確性
五、特異性
六、可重復性
七、多參數分析
第六節 常見影響因素
一、溫度
二、pH
三、熒光染料濃度
四、雜質
五、細胞固定劑
六、溶液黏度
七、其他因素
第二章 流式分析術及流式分選術的應用
第三章 流式細胞術的臨床應用
附錄
第一節 流式細胞術與流式細胞儀概述
一、流式細胞術概述
二、流式細胞儀
(一)基本結構
(二)工作原理
(三)分析型流式細胞儀介紹
(四)分選型流式細胞儀介紹
第二節 熒光染料的選擇與常用的染色技術
一、熒光染料的特性及其應用
二、常用的染色技術.
(一)細胞免疫熒光染色技術
(二)核酸熒光染色技術.
(三)熒光微球捕獲染色技術
第三節 結果分析與流式圖 第一章 總論
第一節 流式細胞術與流式細胞儀概述
一、流式細胞術概述
二、流式細胞儀
(一)基本結構
(二)工作原理
(三)分析型流式細胞儀介紹
(四)分選型流式細胞儀介紹
第二節 熒光染料的選擇與常用的染色技術
一、熒光染料的特性及其應用
二、常用的染色技術.
(一)細胞免疫熒光染色技術
(二)核酸熒光染色技術.
(三)熒光微球捕獲染色技術
第三節 結果分析與流式圖
一、流式通道
二、流式直方圖
三、流式散點圖
四、流式等高線圖
第四節 流式細胞術的基本操作與技巧
一、標本的采集、運送與儲存
二、標本的處理
(一)獨立細胞樣品制備
(二)免疫器官樣品制備
(三)實體臟器樣品制備
三、熒光素偶聯抗體及其標記方法
(一)熒光素與熒光素偶聯抗體
(二)樣品封閉
(三)熒光素偶聯抗體標記
四、光電倍增管電壓設定
五、對照的設置
(一)陰性對照的設置
(二)FMO對照
(三)陽性對照的設置
六、補償調節
(一)補償調節的原理
(二)調節補償的具體方法
(三)三色和四色分析補償調節方法
(四)影響補償大小的因素
七、閾值設定
(一)減少樣品中死細胞比例的方法
(二)流式分析時區分死細胞和活細胞的方法
八、流式分選模式選擇
(一)純度模式
(二)得率模式(富集模式)
(三)單細胞模式
九、上樣速度控制
(一)流式分析速度控制
(二)流式分選速度控制
十、分選設門基本原則
十一、流式分選基本步驟
第五節 方法學特點
一、單細胞分析
二、定量分析
三、快速性
四、準確性
五、特異性
六、可重復性
七、多參數分析
第六節 常見影響因素
一、溫度
二、pH
三、熒光染料濃度
四、雜質
五、細胞固定劑
六、溶液黏度
七、其他因素
第二章 流式分析術及流式分選術的應用
第三章 流式細胞術的臨床應用
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