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王寶琴著的《口蹄疫及其轉基因植物疫苗》分上、下兩篇。上篇為概述,內容為口蹄疫病毒基因組基本結構及其分子生物學特徵、口蹄疫疫苗研究進展、植物反應器生產醫用蛋白的研究進展及口蹄疫轉基因植物疫苗的研究等;下篇為實驗操作,內容為口蹄疫病毒Akesu/O/58毒株的結構基因VP1和VP1的克隆及分析、植物雙元表達載體的構建、根癌農桿菌介導的VP1基因在煙草中的轉化與表達、VP1基因在兩種豆科牧草中的轉化與轉基因植株的獲得、FMDV VP1轉基因煙草對Balb/C小鼠免疫效果的觀察,並對口蹄疫轉基因植物疫苗的研究進行了總結與展望。書中以插圖的形式呈現了基因的克隆、載體構建、轉基因植株篩選、移栽、動物免疫試驗等結果,書後還附有常用的英文縮略語、口蹄疫病毒基因序列等。
本書從口蹄疫病毒結構基因的選擇,植物雙元表達載體構建到轉基因煙草和牧草的獲得,以及對小鼠免疫保護試驗等方面系統地介紹了植物反應器作為可飼化疫苗的實際操作技術和可行性,並從目的基因選擇、轉化方法、受體植物、免疫效果等方面對口蹄疫轉基因植物疫苗的發展進行了總結和展望。
本書可作為高校和科研單位,以及從事新型疫苗研究的畜牧獸醫學、生物學等專業人員的參考書。
本書從口蹄疫病毒結構基因的選擇,植物雙元表達載體構建到轉基因煙草和牧草的獲得,以及對小鼠免疫保護試驗等方面系統地介紹了植物反應器作為可飼化疫苗的實際操作技術和可行性,並從目的基因選擇、轉化方法、受體植物、免疫效果等方面對口蹄疫轉基因植物疫苗的發展進行了總結和展望。
本書可作為高校和科研單位,以及從事新型疫苗研究的畜牧獸醫學、生物學等專業人員的參考書。
目次
前言
上篇 概述
1 口蹄疫病毒基因組基本結構及其分子生物學特徵
1.1 口蹄疫概述
1.2 口蹄疫流行概況
1.3 口蹄疫病毒分類及結構
1.4 口蹄疫病毒基因組基本結構
1.5 口蹄疫病毒結構蛋白主要功能
1.6 口蹄疫病毒非結構蛋白主要功能
1.7 阿克蘇(Akesu/O/58)口蹄疫病毒基因組結構及特點
參考文獻
2 口蹄疫疫苗研究進展
2.1 口蹄疫傳統疫苗
2.1.1 FMD弱毒疫苗
2.1.2 FMD滅活疫苗
2.2 口蹄疫新型疫苗
2.2.1 FMD基因工程亞單位疫苗
2.2.2 FMD合成肽疫苗
2.2.3 FMD融合蛋白疫苗
2.2.4 FMD核酸疫苗
2.2.5 FMD重組活載體疫苗
2.2.6 FMD基因缺失疫苗
2.2.7 FMD反向遺傳疫苗
2.3 免疫效果和水平監測
參考文獻
3 植物反應器生產醫用蛋白的研究進展
3.1 轉基因植物生產疫苗的基本流程和表達系統
3.2 轉基因植物疫苗的研究概況
3.3 轉基因植物疫苗的臨床應用
3.4 轉基因植物抗體的研究概況
3.5 轉基因植物抗體的臨床應用
3.6 轉基因植物藥用蛋白的研究概況
3.7 生物安全性評價
3.7.1 對健康的影響
3.7.2 對環境和生態的影響
3.7.3 轉基因植物的檢測
參考文獻
4 口蹄疫轉基因植物疫苗的研究
4.1 國外研究概況
4.2 國內研究概況
4.2.1 口蹄疫病毒結構基因P1在馬鈴薯中的轉化與表達
4.2.2 口蹄疫病毒結構基因P1在玉米中的轉化與表達
4.2.3 口蹄疫病毒結構基因P1在水稻中的轉化與表達
4.2.4 口蹄疫病毒結構基因VP1在熱帶牧草柱花草中的轉化與表達
4.2.5 口蹄疫病毒結構基因在豆科植物中的轉化與表達
參考文獻
下篇 實驗操作
5 阿克蘇(Akesu/O/58)FMDV結構基因VP1和P1的克隆與核苷酸序列分析
5.1 目的
5.2 基本原理與技術路線
5.3 材料與方法
5.3.1 材料
5.3.2 方法
5.4 結果
5.4.1 目的基因的獲得
5.4.2 目的基因的克隆與鑒定
5.4.3 目的基因的核苷酸和氨基酸序列
5.5 討論
5.6 結論
參考文獻
6 植物雙元表達載體的構建
6.1 目的
6.2 基本原理與技術路線
6.3 材料與方法
6.3.1 材料
6.3.2 方法
6.4 結果
6.4.1 目的基因的擴增
6.4.2 中間表達載體的鑒定
6.4.3 目的基因核苷酸序列測定與分析
6.4.4 植物雙元表達載體的構建和鑒定
6.5 討論
6.6 結論
參考文獻
7 根癌農桿菌介導的阿克蘇(Akesu/O/58)FMD結構基因VP1在煙草中的轉化與表達
7.1 目的
7.2 技術路線
7.3 材料與方法
7.3.1 材料
7.3.2 方法
7.4 結果
7.4.1 轉化植株的抗性篩選和抗性植株的獲得
7.4.2 目的基因和選擇性報告基因的PCR檢測
7.4.3 目的基因和選擇性報告基因的轉錄水平檢測
7.4.4 目的基因的DNA點雜交和PCR-Southern印跡
7.4.5 目的基因的表達
7.5 討論
7.6 結論
參考文獻
8 阿克蘇(Akesu/O/58)FMDV VP1基因在兩種豆科牧草中的轉化與轉基因植株的獲得
8.1 目的
8.2 基本原理與技術路線
8.3 材料與方法
8.3.1 材料
8.3.2 方法
8.4 結果
8.4.1 組織培養觀察
8.4.2 雙元表達載體的鑒定
8.4.3 轉化植株的篩選和抗性植株的獲得
8.4.4 目的基因和選擇性報告基因的PCR檢測
8.4.5 目的基因和選擇性報告基因的轉錄水平檢測
8.4.6 目的基因DNA點雜交和PCR-Southern印跡
8.4.7 目的蛋白的Western Blot檢測
8.5 討論
8.6 結論
參考文獻
9 FMDV VP1 轉基因煙草對Balb/C小鼠免疫效果的研究
9.1 目的
9.2 技術路線
9.3 材料與方法
9.3.1 材料
9.3.2 方法
9.4 結果
9.4.1 血清抗體的檢測
9.4.2 病毒的乳鼠半數致死量
9.4.3 病毒血症試驗
9.4.4 攻毒保護率
9.5 討論
9.6 結論
參考文獻
10 口蹄疫轉基因植物疫苗研究總結與展望
10.1 口蹄疫轉基因植物疫苗研究總結
10.1.1 目的基因的選擇
10.1.2 轉化受體植物的選擇
10.1.3 轉基因方法的選擇
10.1.4 口蹄疫轉基因植物疫苗免疫效果
10.2 展望
10.2.1 獲得高效穩定表達的轉化植株
10.2.2 提高外源基因轉化率與檢測靈敏度
10.2.3 提高轉基因植物疫苗的免疫效果
參考文獻
符號或縮略語說明
附錄
上篇 概述
1 口蹄疫病毒基因組基本結構及其分子生物學特徵
1.1 口蹄疫概述
1.2 口蹄疫流行概況
1.3 口蹄疫病毒分類及結構
1.4 口蹄疫病毒基因組基本結構
1.5 口蹄疫病毒結構蛋白主要功能
1.6 口蹄疫病毒非結構蛋白主要功能
1.7 阿克蘇(Akesu/O/58)口蹄疫病毒基因組結構及特點
參考文獻
2 口蹄疫疫苗研究進展
2.1 口蹄疫傳統疫苗
2.1.1 FMD弱毒疫苗
2.1.2 FMD滅活疫苗
2.2 口蹄疫新型疫苗
2.2.1 FMD基因工程亞單位疫苗
2.2.2 FMD合成肽疫苗
2.2.3 FMD融合蛋白疫苗
2.2.4 FMD核酸疫苗
2.2.5 FMD重組活載體疫苗
2.2.6 FMD基因缺失疫苗
2.2.7 FMD反向遺傳疫苗
2.3 免疫效果和水平監測
參考文獻
3 植物反應器生產醫用蛋白的研究進展
3.1 轉基因植物生產疫苗的基本流程和表達系統
3.2 轉基因植物疫苗的研究概況
3.3 轉基因植物疫苗的臨床應用
3.4 轉基因植物抗體的研究概況
3.5 轉基因植物抗體的臨床應用
3.6 轉基因植物藥用蛋白的研究概況
3.7 生物安全性評價
3.7.1 對健康的影響
3.7.2 對環境和生態的影響
3.7.3 轉基因植物的檢測
參考文獻
4 口蹄疫轉基因植物疫苗的研究
4.1 國外研究概況
4.2 國內研究概況
4.2.1 口蹄疫病毒結構基因P1在馬鈴薯中的轉化與表達
4.2.2 口蹄疫病毒結構基因P1在玉米中的轉化與表達
4.2.3 口蹄疫病毒結構基因P1在水稻中的轉化與表達
4.2.4 口蹄疫病毒結構基因VP1在熱帶牧草柱花草中的轉化與表達
4.2.5 口蹄疫病毒結構基因在豆科植物中的轉化與表達
參考文獻
下篇 實驗操作
5 阿克蘇(Akesu/O/58)FMDV結構基因VP1和P1的克隆與核苷酸序列分析
5.1 目的
5.2 基本原理與技術路線
5.3 材料與方法
5.3.1 材料
5.3.2 方法
5.4 結果
5.4.1 目的基因的獲得
5.4.2 目的基因的克隆與鑒定
5.4.3 目的基因的核苷酸和氨基酸序列
5.5 討論
5.6 結論
參考文獻
6 植物雙元表達載體的構建
6.1 目的
6.2 基本原理與技術路線
6.3 材料與方法
6.3.1 材料
6.3.2 方法
6.4 結果
6.4.1 目的基因的擴增
6.4.2 中間表達載體的鑒定
6.4.3 目的基因核苷酸序列測定與分析
6.4.4 植物雙元表達載體的構建和鑒定
6.5 討論
6.6 結論
參考文獻
7 根癌農桿菌介導的阿克蘇(Akesu/O/58)FMD結構基因VP1在煙草中的轉化與表達
7.1 目的
7.2 技術路線
7.3 材料與方法
7.3.1 材料
7.3.2 方法
7.4 結果
7.4.1 轉化植株的抗性篩選和抗性植株的獲得
7.4.2 目的基因和選擇性報告基因的PCR檢測
7.4.3 目的基因和選擇性報告基因的轉錄水平檢測
7.4.4 目的基因的DNA點雜交和PCR-Southern印跡
7.4.5 目的基因的表達
7.5 討論
7.6 結論
參考文獻
8 阿克蘇(Akesu/O/58)FMDV VP1基因在兩種豆科牧草中的轉化與轉基因植株的獲得
8.1 目的
8.2 基本原理與技術路線
8.3 材料與方法
8.3.1 材料
8.3.2 方法
8.4 結果
8.4.1 組織培養觀察
8.4.2 雙元表達載體的鑒定
8.4.3 轉化植株的篩選和抗性植株的獲得
8.4.4 目的基因和選擇性報告基因的PCR檢測
8.4.5 目的基因和選擇性報告基因的轉錄水平檢測
8.4.6 目的基因DNA點雜交和PCR-Southern印跡
8.4.7 目的蛋白的Western Blot檢測
8.5 討論
8.6 結論
參考文獻
9 FMDV VP1 轉基因煙草對Balb/C小鼠免疫效果的研究
9.1 目的
9.2 技術路線
9.3 材料與方法
9.3.1 材料
9.3.2 方法
9.4 結果
9.4.1 血清抗體的檢測
9.4.2 病毒的乳鼠半數致死量
9.4.3 病毒血症試驗
9.4.4 攻毒保護率
9.5 討論
9.6 結論
參考文獻
10 口蹄疫轉基因植物疫苗研究總結與展望
10.1 口蹄疫轉基因植物疫苗研究總結
10.1.1 目的基因的選擇
10.1.2 轉化受體植物的選擇
10.1.3 轉基因方法的選擇
10.1.4 口蹄疫轉基因植物疫苗免疫效果
10.2 展望
10.2.1 獲得高效穩定表達的轉化植株
10.2.2 提高外源基因轉化率與檢測靈敏度
10.2.3 提高轉基因植物疫苗的免疫效果
參考文獻
符號或縮略語說明
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