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本書分為兩部分:分子生物學常用材料的基本知識和學生實驗,還有學生自己設計的一套實驗。本書主要適用于生物技術專業以及藥學類專業的高年級本科生和低年級研究生,同時還可供從事分子生物學研究及其相關專業人員參考。
目次
第一部分 分子生物學常用材料的基本知識
第一章 大腸桿菌、質粒和噬菌體
第一節 大腸桿菌
第二節 質粒和噬菌體
第二章 工具酶
第一節 限制性內切核酸酶
第二節 限制性作圖
第三節 用于修飾與放射性標記核酸的酶
第四節 重組DNA分子的構建
第二部分 學生 實驗
實驗一 質粒DNA的制備
實驗二 質粒DNA的電泳檢查
實驗三 感受態細菌的制備及轉化
實驗四 入噬菌體的制備
實驗五 入DNA的制備
實驗六 單個M13噬菌體的分離
實驗七 從M13噬菌體載體中制備單鏈噬菌體DNA
實驗八 M13噬菌體雙鏈復制型DNA的制備
實驗九 哺乳動物基因組DNA的制備(哺乳動物血液DNA的制備)
實驗十 植物基因組DNA的制備
實驗十一 細菌基因組DNA的制備(小量制備細菌基因組DNA)
實驗十二 基因組DNA的電泳分析
實驗十三 組織培養細胞質RNA的制備(一步法從培養細胞或組織中分離RNA)
實驗十四 植物RNA的制備(植物RNA的制備(酚/SDS法)
實驗十五 細菌RNA的制備
實驗十六 帶有poly(A)RNA的制備
實驗十七 DNA的限制性內切核酸酶酶切分析
實驗十八 PCR擴增DNA中的引物設計
實驗十九 PCR擴增DNA中的模板的制備
實驗二十 PCR擴增DNA的基本反應
實驗二十一 限制性內切核酸酶部分消化法作物理圖譜
實驗二十二 DNA酶切片段的回收
實驗二十三 DNA體外重組
實驗二十四 Southern吸印(核酸雜交技術)
實驗二十五 Norther’n雜交
實驗二十六 SDS—PAGE
實驗二十七 Western吸印(蛋白質的免疫印跡技術)
實驗二十八 哺乳動物細胞核或細胞質內蛋白的提取
實驗二十九 用凝膠電泳進行遷移率改變試驗檢測:DNA結合
實驗三十 甲基化和尿嘧啶干擾反應分析蛋白質DNA的作用
實驗三十一 DNase I足跡法分析蛋白DNA結合位點
開放實驗 學生自己設計一套 實驗
設計一 克隆并鑑定一個真核單拷貝基因
設計二 在原核中克隆表達并純化一個真核基因產物
設計三 現有犯罪現場罪犯的血跡和三個犯罪嫌疑人的血樣,請用分子生物學手段確定罪犯
附錄A 聚丙烯酰胺凝膠的配制
附錄B 分子克隆中使用的試劑與緩沖液的配制
第一章 大腸桿菌、質粒和噬菌體
第一節 大腸桿菌
第二節 質粒和噬菌體
第二章 工具酶
第一節 限制性內切核酸酶
第二節 限制性作圖
第三節 用于修飾與放射性標記核酸的酶
第四節 重組DNA分子的構建
第二部分 學生 實驗
實驗一 質粒DNA的制備
實驗二 質粒DNA的電泳檢查
實驗三 感受態細菌的制備及轉化
實驗四 入噬菌體的制備
實驗五 入DNA的制備
實驗六 單個M13噬菌體的分離
實驗七 從M13噬菌體載體中制備單鏈噬菌體DNA
實驗八 M13噬菌體雙鏈復制型DNA的制備
實驗九 哺乳動物基因組DNA的制備(哺乳動物血液DNA的制備)
實驗十 植物基因組DNA的制備
實驗十一 細菌基因組DNA的制備(小量制備細菌基因組DNA)
實驗十二 基因組DNA的電泳分析
實驗十三 組織培養細胞質RNA的制備(一步法從培養細胞或組織中分離RNA)
實驗十四 植物RNA的制備(植物RNA的制備(酚/SDS法)
實驗十五 細菌RNA的制備
實驗十六 帶有poly(A)RNA的制備
實驗十七 DNA的限制性內切核酸酶酶切分析
實驗十八 PCR擴增DNA中的引物設計
實驗十九 PCR擴增DNA中的模板的制備
實驗二十 PCR擴增DNA的基本反應
實驗二十一 限制性內切核酸酶部分消化法作物理圖譜
實驗二十二 DNA酶切片段的回收
實驗二十三 DNA體外重組
實驗二十四 Southern吸印(核酸雜交技術)
實驗二十五 Norther’n雜交
實驗二十六 SDS—PAGE
實驗二十七 Western吸印(蛋白質的免疫印跡技術)
實驗二十八 哺乳動物細胞核或細胞質內蛋白的提取
實驗二十九 用凝膠電泳進行遷移率改變試驗檢測:DNA結合
實驗三十 甲基化和尿嘧啶干擾反應分析蛋白質DNA的作用
實驗三十一 DNase I足跡法分析蛋白DNA結合位點
開放實驗 學生自己設計一套 實驗
設計一 克隆并鑑定一個真核單拷貝基因
設計二 在原核中克隆表達并純化一個真核基因產物
設計三 現有犯罪現場罪犯的血跡和三個犯罪嫌疑人的血樣,請用分子生物學手段確定罪犯
附錄A 聚丙烯酰胺凝膠的配制
附錄B 分子克隆中使用的試劑與緩沖液的配制
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