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實驗教學是高等院校培養高素質、高層次和綜合性人才的必要環節,其目的不僅在于加深學生對已學理論知識的理解,重要的是培養學生的實踐動手能力。分子生物學是從分子水平闡述生物體生命現象和規律的學科,是生物醫學的前沿和生長點。《分子生物學實驗指導/高等醫學院校實驗系列規劃教材》在自編《分子生物學實驗指導講義》的基礎上,結合教師們多年教學經驗編寫而成,共分七個部分:基礎知識、核酸技術、分子克隆、蛋白技術、生物信息學在分子生物學實驗中的應用、綜合性實驗和附錄。
《分子生物學實驗指導/高等醫學院校實驗系列規劃教材》可供高等院校生物、醫藥等專業教學和參考使用。
《分子生物學實驗指導/高等醫學院校實驗系列規劃教材》可供高等院校生物、醫藥等專業教學和參考使用。
目次
前言
第1篇 基礎知識
第1章 分子生物學實驗室的基本要求
1.1 實驗室規則
1.2 實驗室安全防護
1.3 放射性同位素防護
1.4 危險化學試劑防護
1.5 生物安全防護
1.6 實驗室物品與儀器的管理
第2章 實驗記錄與實驗報告
2.1 實驗記錄
2.2 實驗報告
第3章 儀器使用與溶液配制
3.1 常用儀器設備
3.2 溶液配制
第4章 常用實驗用品的處理
4.1 清洗
4.2 消毒滅菌
4.3 液氮的安全使用
第5章 分子生物學實驗技術原理
5.1 細胞培養技術
5.2 大腸桿菌的培養與保存
第2篇 核酸技術
第6章 核酸電泳
6.1 瓊脂糖凝膠電泳分離DNA
6.2 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離DNA
第7章 核酸的分離純化和鑒定
7.1 質粒DNA的提取與純化
7.2 蛋白酶K和苯酚從哺乳動物細胞中分離高分子質量DNA
7.3 其他DNA提取方案
7.4 RNA的提取
第8章 聚合酶鏈反應(PCR)
8.1 普通PCR
8.2 RT-PCR
8.3 熒光定量PCR
第9章 核酸分子雜交
9.1 斑點雜交
9.2 原位雜交
9.3 Southern印跡雜交
9.4 Northern印跡雜交
第3篇 分子克隆
第10章 DNA的酶切
10.1 實驗目的
10.2 實驗原理
10.3 儀器、材料與試劑
10.4 實驗流程
10.5 實驗步驟
10.6 結果分析
10.7 注意事項
10.8 應用
第11章 DNA的連接
11.1 實驗目的
11.2 實驗原理
11.3 儀器、材料與試劑
11.4 實驗流程
11.5 實驗步驟
11.6 結果分析
11.7 注意事項
11.8 應用
第12章 大腸桿菌感受態細胞的制備及轉化
12.1 實驗目的
12.2 實驗原理
12.3 儀器、材料與試劑
12.4 實驗流程
12.5 實驗步驟
12.6 結果分析
12.7 注意事項
12.8 應用
第13章 重組子的鑒定
13.1 實驗目的
13.2 實驗原理
13.3 儀器、材料與試劑
13.4 實驗流程
13.5 實驗步驟
13.6 結果分析
13.7 注意事項
13.8 應用
第4篇 蛋白技術
第14章 外源基因在大腸桿菌中的誘導表達
14.1 實驗目的
14.2 實驗原理
14.3 儀器、材料與試劑
14.4 實驗流程
14.5 實驗步驟
14.6 結果分析
14.7 注意事項
14.8 應用
14.9 真核細胞表達外源基因操作步驟
第15章 蛋白質的提取與純化
15.1 實驗目的
15.2 實驗原理
15.3 儀器與試劑
15.4 實驗流程
15.5 實驗步驟
15.6 結果分析
15.7 注意事項
15.8 應用
第16章 蛋白質的定量檢測
16.1 Lowry法測定蛋白質含量
16.2 BCA法測定蛋白質含量
16.3 Bradford法測定蛋白質含量
第17章 目標蛋白質的測定
17.1 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳
17.2 蛋白質的免疫印跡技術(Western-Blot)
17.3 免疫共沉淀
17.4 雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質
第18章 基因工程菌的大規模培養及高密度發酵技術
18.1 實驗目的
18.2 實驗原理
18.3 儀器與試劑
18.4 實驗流程
18.5 實驗步驟
18.6 結果分析
18.7 注意事項
18.8 應用
第5篇 生物信息學在分子生物學實驗中的應用
第19章 核酸和蛋白質序列的查詢和分析
19.1 核酸與蛋白質序列的數據庫查詢
19.2 核酸與蛋白質序列的相似性分析
第20章 常用的分子生物學分析軟件
20.1 多序列比對軟件
20.2 構建系統發育樹軟件
20.3 引物設計軟件
第6篇 綜合性實驗
第21章 綜合性實驗概述
21.1 實驗要求
21.2 綜合實驗報告
21.3 實驗目的
21.4 實驗安排
21.5 實驗材料
21.6 實驗流程
21.7 實驗步驟
第22章 綜合性實驗案例
22.1 阿爾茨海默病(Alzlaeimer disease,AD)
22.1 2 katG基因全部缺失和點突變等引起結核菌產生對異煙肼(INH)的耐藥研究
22.3 亨延頓舞蹈病(Huntingtodisease,HD)
22.4 H7N9禽流感病
22.5 神經營養因子(neurotrotrophic factors,NTFs)
附錄
附錄A 分子生物學實驗中的常用數據及換算關系
附錄B 分子生物學實驗中的常用試劑
附錄C 常用細菌培養基和抗生素溶液
附錄D 與分子生物學實驗相關的實驗資料
參考文獻
第1篇 基礎知識
第1章 分子生物學實驗室的基本要求
1.1 實驗室規則
1.2 實驗室安全防護
1.3 放射性同位素防護
1.4 危險化學試劑防護
1.5 生物安全防護
1.6 實驗室物品與儀器的管理
第2章 實驗記錄與實驗報告
2.1 實驗記錄
2.2 實驗報告
第3章 儀器使用與溶液配制
3.1 常用儀器設備
3.2 溶液配制
第4章 常用實驗用品的處理
4.1 清洗
4.2 消毒滅菌
4.3 液氮的安全使用
第5章 分子生物學實驗技術原理
5.1 細胞培養技術
5.2 大腸桿菌的培養與保存
第2篇 核酸技術
第6章 核酸電泳
6.1 瓊脂糖凝膠電泳分離DNA
6.2 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離DNA
第7章 核酸的分離純化和鑒定
7.1 質粒DNA的提取與純化
7.2 蛋白酶K和苯酚從哺乳動物細胞中分離高分子質量DNA
7.3 其他DNA提取方案
7.4 RNA的提取
第8章 聚合酶鏈反應(PCR)
8.1 普通PCR
8.2 RT-PCR
8.3 熒光定量PCR
第9章 核酸分子雜交
9.1 斑點雜交
9.2 原位雜交
9.3 Southern印跡雜交
9.4 Northern印跡雜交
第3篇 分子克隆
第10章 DNA的酶切
10.1 實驗目的
10.2 實驗原理
10.3 儀器、材料與試劑
10.4 實驗流程
10.5 實驗步驟
10.6 結果分析
10.7 注意事項
10.8 應用
第11章 DNA的連接
11.1 實驗目的
11.2 實驗原理
11.3 儀器、材料與試劑
11.4 實驗流程
11.5 實驗步驟
11.6 結果分析
11.7 注意事項
11.8 應用
第12章 大腸桿菌感受態細胞的制備及轉化
12.1 實驗目的
12.2 實驗原理
12.3 儀器、材料與試劑
12.4 實驗流程
12.5 實驗步驟
12.6 結果分析
12.7 注意事項
12.8 應用
第13章 重組子的鑒定
13.1 實驗目的
13.2 實驗原理
13.3 儀器、材料與試劑
13.4 實驗流程
13.5 實驗步驟
13.6 結果分析
13.7 注意事項
13.8 應用
第4篇 蛋白技術
第14章 外源基因在大腸桿菌中的誘導表達
14.1 實驗目的
14.2 實驗原理
14.3 儀器、材料與試劑
14.4 實驗流程
14.5 實驗步驟
14.6 結果分析
14.7 注意事項
14.8 應用
14.9 真核細胞表達外源基因操作步驟
第15章 蛋白質的提取與純化
15.1 實驗目的
15.2 實驗原理
15.3 儀器與試劑
15.4 實驗流程
15.5 實驗步驟
15.6 結果分析
15.7 注意事項
15.8 應用
第16章 蛋白質的定量檢測
16.1 Lowry法測定蛋白質含量
16.2 BCA法測定蛋白質含量
16.3 Bradford法測定蛋白質含量
第17章 目標蛋白質的測定
17.1 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳
17.2 蛋白質的免疫印跡技術(Western-Blot)
17.3 免疫共沉淀
17.4 雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質
第18章 基因工程菌的大規模培養及高密度發酵技術
18.1 實驗目的
18.2 實驗原理
18.3 儀器與試劑
18.4 實驗流程
18.5 實驗步驟
18.6 結果分析
18.7 注意事項
18.8 應用
第5篇 生物信息學在分子生物學實驗中的應用
第19章 核酸和蛋白質序列的查詢和分析
19.1 核酸與蛋白質序列的數據庫查詢
19.2 核酸與蛋白質序列的相似性分析
第20章 常用的分子生物學分析軟件
20.1 多序列比對軟件
20.2 構建系統發育樹軟件
20.3 引物設計軟件
第6篇 綜合性實驗
第21章 綜合性實驗概述
21.1 實驗要求
21.2 綜合實驗報告
21.3 實驗目的
21.4 實驗安排
21.5 實驗材料
21.6 實驗流程
21.7 實驗步驟
第22章 綜合性實驗案例
22.1 阿爾茨海默病(Alzlaeimer disease,AD)
22.1 2 katG基因全部缺失和點突變等引起結核菌產生對異煙肼(INH)的耐藥研究
22.3 亨延頓舞蹈病(Huntingtodisease,HD)
22.4 H7N9禽流感病
22.5 神經營養因子(neurotrotrophic factors,NTFs)
附錄
附錄A 分子生物學實驗中的常用數據及換算關系
附錄B 分子生物學實驗中的常用試劑
附錄C 常用細菌培養基和抗生素溶液
附錄D 與分子生物學實驗相關的實驗資料
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