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第一章 核酸的提取與檢測 001
實驗1 堿裂解法提取質粒DNA及純化 001
實驗2 提取純化大腸桿菌基因組DNA 005
實驗3 CTAB法提取植物基因組DNA 009
實驗4 酚氯仿法提取人外周血基因組DNA 012
實驗5 TRIzol法提取擬南芥總RNA 016
實驗6 哺乳動物mRNA的分離及純化 018
第二章 核酸的操作技術 025
實驗7 限制性內切酶酶切質粒DNA和瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA 025
實驗8 PCR技術擴增目的基因
033
實驗9 RT-PCR技術檢測基因表達
046
實驗10 熒光定量PCR檢測油菜MPK6基因的實時表達量
050
實驗11 Southern印跡雜交
058
實驗12 RNase保護分析檢測RNA表達技術
064
實驗13 以λ噬菌體為載體構建cDNA文庫
068
實驗14 GUS染色法檢測報告基因在植物組織的特異性表達 075
第三章
外源基因轉化受體細胞技術
079
實驗15 感受態細胞的製備與質粒DNA的轉化 079
實驗16 脂質體介導的哺乳動物細胞轉染技術 084
實驗17 農桿菌介導的浸花法轉化擬南芥 087
第四章 蛋白質分離、檢測與互作 091
實驗18 Western blotting檢測人血清免疫球蛋白的相對分子質量及表達差異 091
實驗19 凝膠電泳遷移率實驗分析蛋白質-DNA互作 102
實驗20 酵母雙雜交系統研究蛋白質-蛋白質相互作用 107
實驗21 熒光雙分子互補(BiFC)實驗 116
第五章綜合性實驗 120
實驗22 基因芯片技術鑒定細菌種類 120
實驗23 微量樣本提取人基因組DNA檢測性別 126
實驗24 TA克隆法構建Hsp70基因克隆載體 132
實驗25 紅色熒光蛋白(RFP)基因和綠色熒光蛋白(GFP)
基因克隆載體的構建 140
實驗26 綠色熒光蛋白(GFP)基因表達載體的構建 150
實驗27 GFP基因在原核生物中的表達及鑒定 164
實驗28 哺乳動物FARS基因定點突變重組子的構建及誘導表達 172
實驗29 利用CRISPR/Cas9技術敲除擬南芥BRI 1 基因 177
實驗30 人白細胞介素2(hlL-2)基因工程藥物的製備 191
附錄 207
附錄一分子生物學實驗室規範 207
附錄二實驗室常用試劑配製方法 209
附錄三核酸、蛋白質的各種換算 213
附錄四分子生物學實驗其他資料 214
彩插
實驗1 堿裂解法提取質粒DNA及純化 001
實驗2 提取純化大腸桿菌基因組DNA 005
實驗3 CTAB法提取植物基因組DNA 009
實驗4 酚氯仿法提取人外周血基因組DNA 012
實驗5 TRIzol法提取擬南芥總RNA 016
實驗6 哺乳動物mRNA的分離及純化 018
第二章 核酸的操作技術 025
實驗7 限制性內切酶酶切質粒DNA和瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA 025
實驗8 PCR技術擴增目的基因
033
實驗9 RT-PCR技術檢測基因表達
046
實驗10 熒光定量PCR檢測油菜MPK6基因的實時表達量
050
實驗11 Southern印跡雜交
058
實驗12 RNase保護分析檢測RNA表達技術
064
實驗13 以λ噬菌體為載體構建cDNA文庫
068
實驗14 GUS染色法檢測報告基因在植物組織的特異性表達 075
第三章
外源基因轉化受體細胞技術
079
實驗15 感受態細胞的製備與質粒DNA的轉化 079
實驗16 脂質體介導的哺乳動物細胞轉染技術 084
實驗17 農桿菌介導的浸花法轉化擬南芥 087
第四章 蛋白質分離、檢測與互作 091
實驗18 Western blotting檢測人血清免疫球蛋白的相對分子質量及表達差異 091
實驗19 凝膠電泳遷移率實驗分析蛋白質-DNA互作 102
實驗20 酵母雙雜交系統研究蛋白質-蛋白質相互作用 107
實驗21 熒光雙分子互補(BiFC)實驗 116
第五章綜合性實驗 120
實驗22 基因芯片技術鑒定細菌種類 120
實驗23 微量樣本提取人基因組DNA檢測性別 126
實驗24 TA克隆法構建Hsp70基因克隆載體 132
實驗25 紅色熒光蛋白(RFP)基因和綠色熒光蛋白(GFP)
基因克隆載體的構建 140
實驗26 綠色熒光蛋白(GFP)基因表達載體的構建 150
實驗27 GFP基因在原核生物中的表達及鑒定 164
實驗28 哺乳動物FARS基因定點突變重組子的構建及誘導表達 172
實驗29 利用CRISPR/Cas9技術敲除擬南芥BRI 1 基因 177
實驗30 人白細胞介素2(hlL-2)基因工程藥物的製備 191
附錄 207
附錄一分子生物學實驗室規範 207
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